武汉云克隆科技股份有限公司

作为一个实验工作者，在做IHC和IF等实验时，扫描显微镜图像有没有遇到各种各样的问题呢？今天跟大家探讨下，希望对您的实验有帮助。

对于最常见的问题，总结一下，有这样几点：

                                                                   1. 图像得到的信息不全；

                                                                   2. 光漂白，拍照过程中，荧光猝灭；

                                                                   3. 图像中出现亮点；

                                                                   4. 不同荧光出现串色；

                                                                   5. 光照不均匀，图像一部分异常亮，另一部分暗。

而基于我们近十年的实验经验，针对上面的问题，比较有效的解决或改善办法展示如下：

                                                                   1. 可先低倍镜获得尽可能完整的信息，再通过放大倍数选择不同视野进行拍摄；

                                                                   2. 以尽快的速度观察和拍摄，或加入抗猝灭剂；

                                                                   3. 如果不是蛋白本身在该部位表达量高的话，可考虑增加洗涤次数；

                                                                   4. 一般是显微镜配置导致的，很难通过操作改善，考虑换显微镜拍摄；

                                                                   5. 调整显微镜或重新设置显微镜，对汞灯进行初始化校正。

由以上可以看出，实验结果的这些缺陷一些是人为因素造成的，一些则是由于显微镜配置或成像原理而不可避免产生的。

降低人为干扰需长期的反复实验来改善，而硬件设施的改善则因为一些单位或科研院所经费紧张，没办法购置其他仪器；或者由于拍摄的图像不多，没必要配备其他仪器而没有办法实现。

这种情况，云克隆可以为您提供贴心的实验服务及切片扫描服务。

我公司拥有丰富的组织芯片制备、IHC、IF等实验经验，采用Pannoramic SCAN全景扫描仪进行的图片拍摄、存档及相关处理。

全景扫描仪的工作原理是通过将切片在扫描仪的镜头下快速移动进行扫描并无缝拼接，生成一张全视野的数字化切片，可最大化还原组织的原始信息，同时克服了显微镜拍照视野的局限性。

由于扫描速度快，得到的图片可以电子档的形式永久保存，操作人员可脱离显微镜，在电脑上实现组织切片任意部位任意倍数（2倍~400倍）观察和截取图片，这样就避免了玻片物理损坏或丢失，及样本荧光猝灭对实验结果长期保存所产生的影响。

再者由于全景扫描仪自身的配置，不会出现图像一部分异常亮，另一部分暗和不同荧光出现串色的情况。

研究过程中最常见的实验服务展示如下：

以下是我们在日常实验过程中得到的部分结果：

大鼠大脑IHC

大鼠骨折模型Masson染色

小鼠鼻骨荧光双标（FITC+A594）