第二信使cAMP

cAMP(环腺甘酸) 由 ATP(三磷酸腺苷)衍生而来,其在生物体内发挥重要 作用:可在依赖于 cAMP 的信号传导通路中发挥作用,并在多种生物进程中扮演 重要的第二信使的角色。例如:cAMP 可以介导传递胰高血糖素和肾上腺素的激 素效应;cAMP 也可结合并调节包括 HCN 等在内的离子通道。cAMP 的结构见图 1。

在不同生物体内,cAMP 发挥着不同的生物学作用。真核细胞中,cAMP 及相 关激酶在糖原、糖,以及脂类代谢过程中通过激活蛋白激酶 A(PKA,或依赖 cAMP 的蛋白激酶)发挥作用;阿米巴虫中,cAMP 作为细胞外的分泌信号,其周期波 动在细胞间传播能使细胞趋同聚集;细菌中,cAMP 水平的高低随着培养基中葡 萄糖浓度的含量升高而降低,原因是葡萄糖转运到细胞中时会抑制 cAMP 产生酶 --腺苷酸环化酶的作用。

在病理方向,cAMP 在人肿瘤和前额皮质紊乱中有重要作用。鉴于 cAMP 是 激素发生生理反应的媒介物,深入研究该分子具有重要理论与现实意义。 Cloud-Clone Corp.针对该蛋白研制出了偶联载体的 cAMP 分子、针对 cAMP 的特 异性抗体等试剂,供广大研究者使用。

作为一种化学小分子,cAMP 分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才 能使其成为具有免疫原性的抗原。Cloud-Clone Corp.在 cAMP 分子上分别偶联了 BSA、OVA、HSA,得到 BSA Conjugated cAMP(CPA003Ge11)、OVA Conjugated cAMP (CPA003Ge21)和 HSA Conjugated cAMP(CPA003Ge41)。并以偶联 OVA-cAMP 为抗原,免疫兔获得抗血清后,通过纯化和筛选得到抗 cAMP 特异性 的多抗(PAA003Ge01),同时该抗体还标记上生物素(biotin),获得 biotin 标记的 抗 cAMP 多抗(以 OVA-cAMP 为抗原,得到 cAMP 多抗后与生物素偶联得到 PAA003Ge71)。

该抗体 Western Blot 质量验证结果如图 2 所示,同时,我们还用人肝脏组织对 该抗体进行了 IHC 验证(如图 3),结果显示在肝脏组织中有强阳性信号,且主要 集中于细胞膜上。以上实验证明了抗 cAMP 抗体的高特异性。

在 cAMP 偶联载体分子和及其抗体研制成功的基础上,Cloud-Clone Corp.还 研发了 cAMP 检测试剂盒,货号为 CEA003Ge,由于 cAMP 是一个小分子,且在不 同物种中以同样的形式存在,所以抗体和试剂盒可应用于不同物种的 cAMP 检测。

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