高灵敏度的IL-6检测产品
IL-6 是白细胞介素的一种，在机体中可发挥促炎和抗炎两种功能，是一种 典型的前炎性细胞因子，由 IL-6 基因编码。T 细胞和巨噬细胞在遭遇病原体等 外来物质入侵时，会进行分化增殖，产生大量 IL-6，刺激机体产生免疫应答， 在感染、创伤、烧伤或其它组织损伤导致的炎症部位，IL-6 水平会显著性上调。 IL-6 可通过 TNF-alpha 和 IL-1 进行负反馈调节，通过 IL-1ra 和 IL-10 进行正反 馈调节。在临床研究中，已发现 IL-6 与很多系统的疾病存在广泛的联系，如牙 周炎、急性心肌梗塞、妊娠期高血压、前列腺癌及肿瘤等。
随着 IL-6 研究的不断深入，Cloud-Clone Corp.公司开发了一系列不同物种 IL-6 的重组蛋白、抗体以及 ELISA 定量检测试剂盒，特别是针对样本中 IL-6 含量不高的问题，公司研发了具有高灵敏度的 IL-6 Elisa 检测试剂盒，并将试剂 盒中的高纯度、高特异性的单抗进行了商品化。
人 IL-6 天然蛋白全长 212 个氨基酸，分子量约为 24 kDa，因为前面 29 个 氨基酸是信号肽，Cloud-Clone Corp.选取了 Pro29~Met212 这一片段在 E.coli 中 进行表达得到重组蛋白（RPA079Hu01）。由于含有 GST 标签，重组蛋白分子量 约为 47kD，对重组蛋白进行 SDS-PAGE 验证其分子量以及纯度，如图 1。
用 RPA079Hu01 重组蛋白免疫家兔并用偶联抗原的亲和柱层析进行纯化获 得高纯度的兔抗人 IL-6 多克隆抗体（PAA079Hu01）。将 PAA143Hu01 与生物素 偶联得到（PAA079Hu71）生物素偶联多抗，带有生物素标记后，可更方便更直 接对体内外 IL-6 进行检测。通过 Western Blot 和 IHC 等方法对抗体进行验证。 用 PAA079Hu01 对血浆样本进行 WB 检测，结果如图 2 所示。用人肝脏组织进 行 IHC 检测结果展示于图 3 中，结果显示在人肝脏组织中该蛋白主要是分泌型。
在 IL-6 重组蛋白和及其抗体研发成功的基础上，Cloud-Clone Corp.研发了 IL-6 检测试剂盒，包括 Elisa 试剂盒（SEA079Hu）以及化学发光试剂盒 （SCA079Hu）。
但我们都知道 IL-6 在正常机体中含量很低，只有在感染、创伤烧伤或其它 组织损伤导致的炎症机体才会刺激 IL-6 的产生，所以许多生物样本 IL-6 含量很 低。针对这一问题，公司反复研究获得了高纯度，高特异性的小鼠抗人单克隆 抗体 MAA079Hu22，它是由 RPA079Hu01 重组蛋白免疫小鼠并经过亲和层析纯 化得到，在进行 SDS-PAGE，WB 以及 IHC 时只需要微量就具有很高的检测能 力。
在高纯度，高特异性的单抗基础上，公司不断调整获得了具有高灵敏度的 IL-6 Elisa 检测试剂盒（HEA079Hu）。灵敏度是指 20 个空白样品(即标准品稀释 液)测定的平均值加二倍标准差所对应的浓度。高敏试剂盒最低检测浓度为 0.156 pg/ml，灵敏度为 0.047 pg/ml；相较于 SEA079Hu 的 1.56 pg/ml，灵敏度 0.64 pg/ml， 提高了十倍或以上。
除了人 IL-6 的产品外，Cloud-Clone Corp.公司还成功开发了包括大小鼠、 兔、狗等 10 个物种约 70 种 IL-6 相关产品，有蛋白、抗体、生物素偶联抗体、 Elisa 试剂盒、化学发光试剂盒等，也有大鼠的高敏试剂盒，这些产品为研究不 同物种中 IL-6 的表达及功能提供了非常完善的技术支持。
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