Cloud-Clone Corp. BCA蛋白定量试剂盒的分析

目前世界上最常用于蛋白浓度检测的试剂盒为:BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)和Bradford法蛋白定量试剂盒(BradfordProtein Assay Kit)。BCA法具有简单、稳定、灵敏的特点。

BCA法测定蛋白浓度兼容性也很好,因为它不受大部分样本中其他成分的影响。对于5%以内的SDS、Triton X-100、Tween 20、Tween 80具有很好的兼容性。在50~1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系,最小检出量为25μg/ml。

当然,武汉云克隆公司也研发了自己的BCA蛋白浓度测定试剂盒。那么现就标准曲线,标准OD(450nm)值,样品OD(450nm)值,内控回收率及变异系数等方面将自配试剂盒与Thermo试剂盒进行比较分析。

1、原始OD(450nm)比较

自配试剂盒与Thermo试剂盒原始数据对比表如下:

2、标准曲线及标准OD值(450nm)比较

经过自配试剂盒与Thermo试剂盒的比较及实验结果分析得知:自己配制的试剂盒与Thermo试剂盒标准曲线线性良好,R2值为0.9995。

3、样品OD值比较及内控回收率

采用自己配制的BSA标准品作为Thermo试剂盒的内控,高值(1000ug/ml)回收率为95.5%,低值(125ug/ml)回收率为110.7%;采用Thermo的BSA标准品作为自己配制试剂盒的内控,高值回收率和低值回收率分别为97.57%和105.98%。(内控回收率一般应控制在80%~120%)

4、变异系数比较

分别用自配试剂盒与Thermo试剂盒测定样品B970,ZBP1-1,A503,SLIT3-3和PE4,测定的变异系数在10%以内。

通过从标准曲线,标准OD(450nm)值,样品OD(450nm)值,内控回收率及变异系数等方面对自配试剂盒与Thermo试剂盒进行对比分析,我们可以了解到:云克隆自配BCA试剂盒标准曲线线性良好,R2值可达0.9995,内控回收率可控于95%-111%之间,且变异系数小于10%。这些数据充分证明了云克隆BCA蛋白定量试剂盒的稳定性强与灵敏度高。

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