轻松挥去生物制品中的烦恼——内毒素

内毒素看似高深莫测,其实我们每个人对他都并不陌生,很多出现过细菌感染的人群更对他记忆深刻,因为细菌感染后高烧的罪魁祸首便是内毒素。内毒素,也称为脂多糖或LPS,是革兰氏阴性细菌(例如大肠杆菌)的细胞膜组分。当细菌死亡后,便有大量的内毒素释放出来,这部分内毒素如果进入动物血液循环系统,一方面会大面积的损伤健康细胞,另一面会引起强烈的免疫反应,这便是为什么细菌感染后会出现高烧甚至死亡的原因。由此可见,内毒素对生物体及细胞的伤害性,因此国家对药品特别是注射类药物作出了明确的内毒素去除的要求,同样实验室直接用于细胞培养、注射实验动物等试剂也必须限制内毒素含量。内毒素俨然已成为生物制品制备的最大的烦恼之一。

多粘菌素B(PMB)是由多粘芽胞杆菌(Bacilluspolymyxa)产生的一组多肽类抗生素,能够特异性的抓取试剂中的细菌内毒素,但是又不会抓取试剂中的其他成分,由此而开发的产品被认为是目前市面上最为有效的去内毒素产品。多粘菌素B通常被连接在CNBr-Sepharose上面做成预装柱(IS002),方便小批量的去除内毒素,使样品中的内毒素含量低于1.0EU /ug,能满足多种实验需要,但是这种方法操作比较复杂,对于大批量去除内毒素它就有点力不从心了。针对这种情况,我们对内毒素分子的特性做了更为详细的分析,研发了一款操作简便、且适用于大批量样本去除内毒素的试剂(IS070),该产品主要通过物理的方法将内毒素直接萃取出来,无需进行过柱处理,简单快捷,并且去除内毒素的效果与多粘菌素B类产品一致,经过此方法去除内毒素的产品可以直接用于动物实验。不过这个方法也有一定的缺陷,那就是需要蛋白的耐热性好,并且不适用于脂溶性的样本中内毒素的去除。所以实验人员可以依据样本的物理、化学特性以及实验的用途选择不同的方式对样本进行内毒素的去除。

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