酶联免疫吸附测定实验（ELISA）实验常见问题及解答
在酶联免疫吸附测定实验中，每一个步骤或环节都需要操作者严格控制实验条件，否则可能会影响到最终结果。现就试验中遇到得常见问题进行分析总结，给进一步给出解决方案，希望能为帮助相关实验人员提供实验成功率。
| 问题 | 可能原因 | 解决方案 |
标准曲线差 | 标准品准备不正确 | 进行正确的标准品梯度稀释 |
| 吸取及洗涤不充分 | 充分的吸取及洗涤 | |
| 移液不精确 | 检查和校正移液器 | |
| 精密度低 | 洗涤不充分 | 按说明书要求充分洗涤和浸泡 |
| 混匀不充分和吸取试剂不足 | 充分混匀和吸取试剂 | |
| 重复利用吸头、容器和覆膜 | 使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜 | |
| 加样不精确 | 检查和校正移液器 | |
| O.D值低 | 每孔加的试剂量不精确 | 校正移液器，精确加入试剂 |
| 温育时间不正确 | 保证充足的温育时间 | |
| 温育温度不正确 | 试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度 | |
| 酶标记物或底物失效 | 通过混合酶标记物和底物，颜色应迅速显现来检查 | |
| 没有加入终止液 | 按照说明书实验操作步骤加入终止液 | |
| 超出读数时间读数 | 在说明书推荐的读数时间内读数 | |
| 样本值 | 不正确的样本储存方式 | 正确储存样本，使用新鲜样本进行实验 |
| 不正确的样本收集和处理方法 | 采取正确的样本收集和处理方法 | |
| 待测物质在样本中含量低 | 使用新鲜样本，重复实验 |