蛋白活性实验-巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP1a)
巨噬细胞炎症蛋白1-α也称为趋化因子配体3（CCL3），是属于CC趋化因子家族的细胞因子，它主要参与巨噬细胞，单核细胞和嗜中性粒细胞的募集和活化。
活性实验：本实验采用24孔微趋化系统进行趋化性测定，以评价MIP-1a对人单核细胞株THP1的趋化作用。分别在上室接种THP1细胞（100ul细胞悬浮液，含0.5％FBS的RPMI 1640，细胞数量10 6细胞/ ml），在下室添加MIP-1a（用无血清RPMI 1640稀释至100ng / ml）并在下室中加入用于分离两个隔室的聚碳酸酯过滤器（8um孔径）。37℃，5％CO 2下孵育5h后，取出滤膜，倒置显微镜低倍镜下（100倍）观察低室细胞迁移情况，并以高倍数（400倍）随机计数迁移细胞数（每个过滤器中的五个区域）
结果：通过高倍镜下（400倍）随机计数低室迁移细胞数，显示平均41.2个THP1细胞/区域迁移到具有100ng / ml MIP-1a的无血清RPMI 1640培养基中，而仅有3.6个THP1细胞/区域迁移到无血清RPMI 1640培养基中。由此可知该蛋白拥有生物学活性。低倍镜下（100倍）迁移的THP1细胞如图1所示。
A B
图1.MIP-1-α对THP1细胞的趋化作用
(A)将THP1细胞接种到上腔，并在下腔室加入100ng / ml MIP-1a的无血清RPMI 1640，孵育5h后以低放大倍数（100倍）观察下室细胞;
(B) 将THP1细胞接种到上腔中，并在下腔室中加入无血清RPMI 1640，未加MIP-1a，孵育5h后，以低放大倍数（100倍）观察下室细胞。