蛋白活性实验-人白介素6(IL6)
活性人白介素6(IL6)
白细胞介素6 (IL-6)是一种白细胞介素,它既是一种促炎细胞因子,又是一种抗炎的肌氨酸。目前的数据表明IL-6可通过Jak / Stat3通路直接应用于雌激素受体阳性的乳腺癌细胞增殖抑制实验。
活性实验:本实验旨在检测IL-6对雌激素受体阳性MCF-7细胞的增殖具有抑制作用。细胞接种于96孔板,密度5000细胞/孔,重复3孔,过夜,然后用无血清DMEM中替换培养基中丰富的IL-6。孵育96h后,通过倒置显微镜观察细胞,细胞计数由CCK-8试剂盒测定。简要来说就是,每孔加入10µl CCK-8溶液,然后37°C孵育1 - 4小时,取上清进行450 nm处吸光值的测定。
实验结果:倒置显微镜观察IL-6对MCF-7细胞增殖的抑制作用细胞和被CCK-8检测结果分别如Figure1和Figure2所示(在这种情况下存在剂量依赖的相关性暂未发现)。
A B
Figure 1. The inhibitory effect of IL-6 on cell proliferation of MCF-7 cells .
(A) MCF-7 cells cultured in serum-free DMEM, stimulated with 100ng/ml IL-6 for 96h;
(B)Unstimulated MCF-7 cells cultured in serum-free DMEM for 96h.
Figure 2. The inhibitory effect of IL-6 on cell proliferation of MCF-7 cells detected by CCK8