蛋白活性实验-SCF活性蛋白
蛋白活性实验-SCF活性蛋白
干细胞因子(SCF),也称为肥大细胞生长因子(MGF)和铁因子(SLF),在造血、精子和黑色素生成中起着重要作用。SCF已被证明可以刺激TF-1细胞的增殖。
实验方法:测试这种效果,将TF-1细胞被接种在96 孔板上,密度1 x 104细胞/孔,重复3孔。在不同浓度SCF中37°C孵育72 h,检测不同浓度的SCF。在倒置显微镜下观察细胞的生长,细胞计数以细胞计数(CCK-8)测定细胞增殖。简要来说,每孔添加10µl CCK-8,于37°C孵育1 - 4小时,然后在450 nm处测量吸光度。
实验结果:用倒置显微镜观察添加SCF孵育72h后,TF-1细胞的细胞增殖情况如图1所示。
A B
Figure 1. Cell proliferation of TF-1 cells after stimulated with SCF .
(A) TF-1 cells cultured in RPMI-1640, stimulated with 10ng/ml SCF for 72h;
(B) Unstimulated TF-1 cells cultured in RPMI-1640 for 72h.
SCF的剂量效应曲线如图2所示。很明显,它显著促进了TF-1细胞的增殖,而ED50的效果通常是6.07到13.69ng/ml。
Figure 2. The dose-effect curve of SCF on TF-1 cells