MPTP诱导的小鼠帕金森模型
帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是发生于老年人的中枢神经系统变性性疾病，临床上以震颤、肌强直、运动迟缓为主要特征，并伴随脑内黑质多巴胺能神经元变性死亡、纹状体多巴胺神经递质含量降低。本项目以MPTP诱导建立PD模型小鼠，通过特定药物治疗，观察药物对PD模型小鼠行为学、脑黑质尼氏小体表达、酪氨酸羟化酶（TH）表达的影响。并在实验终点，取脑部黑质、纹状体等组织进行基因组学的后续检测。
实验内容：
SPF级C57／BL6雄性小鼠，鼠龄7-8周，体重20g左右；动物随机分为三组
正常组、PD模型组、PD模型+药物组
PD模型建模方法：
腹腔注射MPTP 20mg／kg／d，连续注射14天。对照组使用等体积生理盐水进行腹腔注射，操作及注意事项相同。MPTP给药结束后，模型建立成功。
药物给以相应的药物处理；正常组、PD模型组使用等体积PBS进行腹腔注射，操作及注意事项相同。
检测项目：
1.行为学检测：
转棒实验：使用小鼠转棒仪检测小鼠的运动协调能力。
将小鼠置于直径为75px的旋转杆上，转速调整为30r/min，每次同时测定5只小鼠，每个隔室中1只。记录小鼠从转棒开始转动至掉落转棒所经历的时间，测定时间为1min，每次中间休息1min，连续5 次，记录1min 内掉落次数。
旷场实验：即自发活动，是检测MPTP损伤后少动的常用指标。
旷场实验所用实验箱为尺寸：500×500×300mm旷场，周壁的颜色为黑色，旷场底面被平均分为16个4×4 个小方格。正上方架摄像头，视野覆盖整个旷场。将动物放置在正中央格，同时进行摄像和计时，时间为5 min。通过计算机示踪分析系统来分析动物在一定时间内的活动状态。实验室保持安静，室温为20 ℃左右，光线充足。观察指标：方格间穿行次数（动物的四肢从一个格进入另一个格为穿行一次）、直立次数（动物双前肢同时离地，或者双前肢放在墙壁上算作直立一次）、中央格停留时间、穿过中央格的次数。
爬杆实验：是评价小鼠运动协调能力的经典方法。通过记录小鼠由杆的顶端往下爬到底部（双前爪着地）所需时间，比较其运动能力。本实验将小鼠放置于一个木制的粗糙的小球上，其下端接有一个表面粗糙、截面为圆形的木棒，木棒下端放置于鼠笼里，当小鼠头朝下方从木球爬至木棒上，用秒表记录此刻的时间为 A，当其爬至木棒最下端时，记录此刻的时间为 B，那么小鼠爬完整个木棒所用的时间为 C，C=A-B，每只小鼠测试俩次，将俩次爬杆的平均时间作为统计指标。
2. 脑组织尼氏体染色
取各组小鼠脑组织，经固定液固定、石蜡包埋、切片后，进行尼氏小体染色。观察各组动物脑组织中尼氏小体的数量。
3. 免疫组化检测脑黑质TH表达
取各组小鼠脑组织切片，修片至脑黑质部位，进行免疫组化染色酪氨酸羟化酶的表达。
4.电镜观察脑部线粒体：电镜下观察小鼠脑部多巴胺能神经元细胞超微结构。低倍视野有基本完整的细胞结构，高倍视野中要有线粒体线粒体特写， MPP组可见铁死亡线粒体：大小变小，双层膜密度增高，外膜断裂，脊减少或消失。
实验结果：
尼氏染色
免疫组化染色TH：TH免疫染色可来评估MPTP对小鼠黑质多巴胺能神经元的毒性损伤作用。模型组小鼠脑组织切片ＴＨ阳性神经元的数目较对照组明显减少。
