活性蛋白巨噬细胞炎性蛋白1β的促趋化作用


巨噬细胞炎性蛋白1β(Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta, MIP-1β),又称CCL4,主要与CCR5受体特异性结合的趋化因子,能特异性趋化淋巴细胞、单核细胞向炎症部位迁移。本实验通过检测MIP-1β对人急性T细胞白血病细胞系Jurkat的趋化作用来评估人重组MIP-1β蛋白的活性。

 

实验方案:
将100uL Jurkat细胞悬液(5×105 cells/mL in RPMI 1640 with FBS free)铺板与培养小室上室,不同浓度的人重组MIP-1β蛋白(0.0001ng/mL, 0.001ng/mL, 0.1ng/mL, 1ng/mL, 10ng/mL, 100ng/mL diluted separately in serum free RPMI 1640)置于培养小室下室,两室之间使用聚碳酸酯滤膜隔开,孵育2h后,移除滤膜并在倒置显微镜下观察并计数细胞迁移数。显微镜下观察迁移的Jurkat细胞如下图:

A. Jurkat细胞接种于上室,0.01ng/mL的 MIP-1β重组蛋白溶于无血清的1640培养基中置于下室,共培养2h后,倒置显微镜下观察下室的细胞。

B. Jurkat细胞接种于上室,无血清的1640培养基中置于下室,共培养2h后,倒置显微镜下观察下室的细胞。

 

结论:

人重组MIP-1β蛋白能促进Jurkat细胞的趋化作用。

 

产品信息:http://www.cloud-clone.com/products/APA093Hu02.html