抗缪勒管激素（AMH）活性蛋白
抗缪勒管激素（Anti-Mullerian Hormone，AMH）又称缪勒管抑制物（Mullerianinhibiting substance，MIS），一种二聚体糖蛋白，属于组织特异性TGF-β超家族生长因子。AMH由产后女性卵巢颗粒细胞（ovarian granulosa cells）及男性睾丸支持细胞（male sertoli cells）表达分泌。在胚胎发育阶段，AMH可调节生殖管道的分化和发育，对性别分化至关重要；出生后， AMH可调节男性睾丸间质细胞的功能；在成年女性中，AMH抑制原始卵泡的募集和窦卵泡的发育，防止卵泡过早耗竭。与其他TGF-β家族成员相似，AMH通过丝氨酸/苏氨酸激酶Ⅰ型受体和Ⅱ型受体发挥生物学作用，尤其是丝氨酸/苏氨酸激酶Ⅱ型受体(AMHRⅡ)。
实验目的 Smad同源物9(SMAD9)被鉴定为AMH的相互作用因子，因此采用结合ELISA法检测重组人AMH与重组人（Smad9）的相互作用。
实验步骤： 用含有0.01%BSA的PBS（pH 7.4）梯度稀释AMH。将100uL样本移入Smad9蛋白预包被的酶标板中，37℃反应2小时。弃去孔内液体，用PBST洗板3次。加入抗AMH的pAb后孵育1小时，弃去孔内液体，用PBST洗板3次。再加入HRP标记的二抗孵育后，弃去孔内液体，用PBST洗板3次。加入底物溶液，在37℃孵育15-25分钟。最后，向孔中加入50µL终止液，并立即在450nm下读数。
实验结果：AMH与Smad9的结合活性如Figure 1所示。
实验结论：
AMH可与Smad9结合，且这种作用呈剂量依赖性。
参考信息：
云克隆抗缪勒管激素（AMH）活性蛋白货号：APA228Hu01