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各种组蛋白的体外检测及提取技术
查看详情组蛋白（histones）是真核细胞核中染色质中的强碱性蛋白质，是真核生物染色体的基本结构蛋白。组蛋白将DNA进行压缩并与DNA一起形成核小体，如果没有组蛋白，染色体DNA解开，形成散乱的很长的DNA链。组蛋白的研究具有非常重要的意义。体内组蛋白的异常会导致许多疾病，如慢性肾病等。同时有关组蛋白的修饰与机体免疫调节，自身免疫病，肿瘤，神经系统疾病，以及内分泌疾病都非常相关。组蛋白有六种类型：H1、H2A、H2B、H3、H4及古细菌组蛋白，它们富含带正电荷的碱性氨基酸，而DNA中主要带负电荷，二者相互作用，使DNA缠绕在组蛋白上......
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总蛋白定量方法简介及优缺点
查看详情蛋白质定量是生物学实验不可缺少的部分，该技术被广泛的用于多个领域和行业，包括生物学科、食品检验、临床检验、疾病诊断等。在实际应用操作过程中，对样本中蛋白质进行准确可靠的定量分析，是常用且重要的工作。尽管目前有多种总蛋白定量的方法，但是由于蛋白质种类繁多，结构复杂，分子量差异大，且功能各异，暂无理想而通用的蛋白质定量分析方法。现介绍目前常用的定量方法以及优选点，实验工作者可根据实验需要，选取合适的定量方法。蛋白定量法可分为以下两大类，化学检测法，包括福林-酚法（Lowry）、二喹啉甲酸法（BCA）、......
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一种高效无缝基因拼接技术
查看详情随着PCR技术的出现，人们逐渐的打开通往研究生命本质的大门，这也使PCR技术成为了上个世纪最为伟大的技术之一。通过PCR技术能在体外迅速、大量、灵敏地扩增出目的基因片段，但是需要灵活的改造基因，只有目的基因片段是远远不够的，还需要一种高效的基因加工手段——基因拼接技术。在实验操作过程中，无论出于基因改造、载体改造以及将来会出现的物种改造等多种涉及DNA操作的实验，都不可避免会使用到基因拼接技术。 1989年Horton等人提出了SOE法（Gene splicing by over lap extension）即通过复制时DNA链的交错延伸来实现基因拼接；......
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活化的caspase 3的检测
查看详情Caspase (Cysteine aspartic acid specific protease，半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶) 是近年发现的一组存在于细胞质中，活化位点均含有半胱氨酸，且特异性断开天冬氨酸残基后肽键的蛋白酶。Caspase在细胞程序性死亡（又称凋亡，apoptosis）中起重要作用。迄今为止，已经发现的人的caspase家族成员已达12种。Caspase 3 是caspase家族的一个重要成员，其在细胞凋亡过程中作为最主要的终末剪切酶行使作用。该蛋白由pro-caspase 3 酶原经过进一步的加工而形成，pro-caspase 3 是一个含有277个氨基酸残基的前体蛋白，对其结构进行分析，可以分......
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IN-FUSION一种高效无酶连接技术
查看详情在传统的分子克隆中，我们经常通过PCR技术扩增得到目的基因后，先构建T-A克隆载体，将基因在大肠杆菌中进行扩增，然后酶切阳性T-A载体和目标载体，最后进行目的基因和目的载体的连接。这个过程大概需要1-2周来完成，而且具有很大的局限性，主要表现在：1、载体多克隆位点和基因内部酶切位点的局限性；2、基因克隆过程中需要添加酶切位点，可能会带入非特异性扩增；3、对于长片段与目标载体的连接效果差；4、无法实现大规模载体的构建。IN-FUSION技术主要来源于INFUSION酶的发现，（如图）INFUSION酶能够识别线性化的DNA片段5’......
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胶原类的特点以及检测方法
查看详情胶原，主要存在于动物结缔组织中的结构蛋白，是哺乳动物中含量最丰富的蛋白质，占到了整个体内蛋白含量的25-35%。胶原可分为纤维型和非纤维型。最常见的是Type I，Type II，Type III，Type IV，Type V。其中Type I，II，III，V均是纤维型，而Type IV是非纤维型。人体绝大多数组织器官都含有胶原，目前为止共发现了28种胶原，而90%以上都是一型胶原。胶原可用于整容外科手术，骨移植，组织再生，伤口治愈等方面；然而胶原突变会引起各类疾病包括成骨不全症，软骨发育不全，埃勒斯-当洛斯综合征，遗传性进行性肾炎，骨质疏松症，Knobl......
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单抗还是多抗？多肽还是重组蛋白？
查看详情我们收到这样一个定制抗体的订单询问，我要定制一个针对小鼠Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG)某一段序列的抗体，这段序列包含35-55位氨基酸，那么我是需要单克隆抗体好还是多克隆抗体好？制备抗体的时候是用多肽作为免疫原好还是用重组蛋白作为免疫原好呢？首先，我们来看看单克隆抗体和多克隆抗体的主要区别在哪里呢？单克隆抗体是针对单一抗原决定簇，来自单个B淋巴细胞克隆的抗体，多克隆抗体是针对多个抗原决定簇，由多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体。通常来说一个含有多个抗原决定簇的大分子免疫原进入机体后，其不同......
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常见免疫检测的抗体标记种类
查看详情标记抗体是免疫电镜样品制备的一种常见方法，该技术由于操作简单、灵敏度高，常应用于IHC，WB，ICC，ELISA等实验。通过标记物的增强放大效应来定位分析抗原，是目前市面上理想的快速价廉的定量检测方法。抗体标记主要有酶标记、荧光素标记、同位素标记、生物素标记等，还有一些其他的标记方法例如胶体金标记，下面具体来展示云克隆公司研发的抗体标记种类：1、辣根过氧化物酶（HRP）标记，HRP标记单抗和多抗的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖基被氧化成醛基，随后与抗体蛋白的氨基结合，形成Schiff碱。常用的HRP的底物有邻苯......