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APOB家族及其受体的检测
查看详情人体APOB由APOB基因进行编码，血浆中极低密度脂蛋白(VLDL )，中间密度脂蛋白(IDL)中均含有APOB。APOB的水平变化与脂质代谢，动脉粥样硬化等脑血管等疾病密切相关，是目前临床研究的热点。APOB在LDL中发挥作用的机理功能尚待研究。血浆中APOB以APOB48和APOB100这两种形式存在，其中APOB48主要在小肠中合成，而APOB100主要在肝脏中合成。APOB100是APOB群中最大的蛋白，通常提到的APOB实际上指的就是APOB100，它有4563个氨基酸。APOB48与APOB100有共同的N端结构，它是由编码APOB100的基因序列在第2153个氨基酸处产生了终止密码子而编码......
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免疫组织化学原理图
查看详情免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。原理图如下：最常选用的免疫学检测方案之一。免疫组化实验中抗原修复方法的选择，抗体工作浓度的确定和染色方案等步骤都是决定实验成败与否的关键。许多实验人员面对繁琐的实验步骤，往往得到了不尽如人意的结果。在此，提前告诉大家一个好消息，Cloud-clone. Corp已开展免疫组化代测服务！！！具体情况，会在下一次的专题中公布，敬请期待！更多信息，请查阅htt......
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重组蛋白的详细构建方法
查看详情应用重组DNA将目标基因进行表达得到的蛋白质成为重组蛋白，重组蛋白在生物信号传导过程，药物研发，科学研究中扮演着重要角色。下面来介绍一下重组蛋白的生产工艺流程。1.基因扩增（1）引物合成搜索目标蛋白基因信息，结合蛋白的结构信息，选取片段或全长设计引物。注意避开跨膜区，以及复杂的二级结构，优选N端或C端，引物评分尽可能高，并搜索出核酸序列的酶切位点，使用载体等信息。经研发部根据研发经验提出修改意见最终定稿后交由第三方公司进行引物合成。（2）基因克隆机重组鉴定1）PCR根据目的蛋白特异性表达组织，选取特异......
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双抗夹心法CLIA检测原理
查看详情双抗夹心化学发光法（CLIA）是将双抗体夹心法与化学发光检测技术结合在一起的检测方法。它的一般实验步骤包括：将特异性针对待测抗原的抗体包被于 96 孔微孔板中，制成固相载体；向微孔中分别加入标准品或标本，使待测抗原与连接于固相载体上的抗体结合；此后加入生物素化的针对待测抗原的抗体，形成夹心；再将未结合的生物素化抗体洗净后，加入 HRP 标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入鲁米诺发光底物，并用光子计数器，读出各孔的相对光度值（RLU）。此法与双抗夹心ELISA法的区别在于采用了增强型的ECL发光体系作为发光底物试剂来实......
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免疫组织化学样本处理I
查看详情免疫组织化学用于观察标本的染色结果对靶抗原抗体进行鉴定和定位，其标本制备非常重要。在制作标本过程中，需保持抗原的完整性，在染色、洗涤包埋等过程中避免发生溶解和变性，同时防止扩散至邻近细胞或组织间隙中。图1. IHC结果示意图组织材料的处理是获得良好免疫组织化学结果的前提，活体组织，各种体液及穿刺液和细胞都可以用于免疫组化分析，针对不同的标本类型可以选择不同的制备方法。活体组织常选用石蜡切片和冰冻切片处理，而体液、穿刺液及细胞样本则选用涂片方式处理。对于细菌菌落或尸体病变组织，可将新鲜切面压印于玻......
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单克隆抗体的详细制备方法
查看详情自Kohler和Milstein建立了淋巴细胞杂交瘤技术后，他们将只针对一种抗原决定簇产生抗体B淋巴细胞和能无限增殖的肿瘤细胞融合杂交，产生既能分泌抗体，又能无限增殖的杂交融合细胞，它所产生的抗体是针对同一抗原决定簇的高度同质的抗体，即单克隆抗体（monoclonal antibody），简称单抗。与多抗相比，单抗纯度高，专一性强、重复性好、且能持续地无限量供应。单抗技术的问世，不仅带来了免疫学领域里的一次革命，而且它在生物医学科学的各个领域获得极广泛的应用，促进了众多学科的发展。单克隆抗体制备的基本过程如下：（1）用抗原......
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降钙素原，常规感染检查的侯选者?
查看详情随着抗生素在临床中使用地越来越广泛，加上新的病毒如SARS，H7N9等的发现，新的问题也随之而来。由于部分患者临床病情隐匿或不典型，并且受到医生个体临床思维及经验局限的影响，症状相似疾病的确诊往往也变得困难起来。特别是对于细菌性感染和非细菌性感染，其治疗手段完全不同，一旦出现误诊，有可能会造成错过最佳诊疗时间，导致病情恶化等严重后果。因此，我们在临床上应该如何判断患者到底是细菌性感染还是非细菌性感染呢？实验人员在研究中发现，PCT（降钙素原，procalcitonin）是一种非常特殊的蛋白质，其结构如图1所示当严......
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实验操作指南-免疫组织化学常见问题和解决方法
查看详情免疫组织化学技术又称免疫细胞化学技术，是指用标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项免疫检测方法。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性和分子生物技术的敏感性等巧妙结合，借助显微镜的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质（如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等），是单一的静止的形态学描述，上升到结构、功能和代谢为一体的动态观察，为疾病的诊断、鉴别诊断和发病机制的研究提供了强有力的手段。然而，要想得到一张高质......