α白蛋白(AFM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

ELISA Kit for Afamin (AFM)

ALB2; ALBA; ALF; A-ALB; Alpha-Albumin

  • α白蛋白(AFM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)产品包装(模拟)
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  • α白蛋白(AFM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)实验结果图
  • CEC284Ra.jpg标准曲线图
  • Certificate通过ISO 9001、ISO 13485质量体系认证

特异性

本试剂盒用于检测α白蛋白(AFM),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。

回收率

分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的α白蛋白(AFM)(加标样品),重复测定并计算其均值,回收率为测定值与理论值的比率。

样本回收率范围(%)平均回收率(%)
serum(n=5)82-10594
EDTA plasma(n=5)87-9590
heparin plasma(n=5)87-10193

精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差: CV<10%
批间差: CV<12%

线性

在定值血清及血浆样本内加入适量的α白蛋白(AFM),并倍比稀释成1:2,1:4,1:8,1:16的待测样本,线性范围即为稀释后样本中α白蛋白(AFM)含量的测定值与理论值的比率。

样本1:21:41:81:16
serum(n=5)79-101%96-103%99-105%81-104%
EDTA plasma(n=5)87-101%78-105%82-98%88-95%
heparin plasma(n=5)92-101%83-101%90-97%79-95%

稳定性

经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

实验流程

1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)50µL,
    加入50µL检测液A(临用前配制);
    37°C温育1小时。
3. 洗板5次;
4. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
5. 加终止液50µL,立即450nm读数。

实验原理

将抗原包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的α白蛋白(AFM)与连接于固相载体上的抗原结合,然后加入HRP标记的二抗,彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的α白蛋白(AFM)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。

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参考文献

杂志参考文献
Journal of Proteomics2D-DIGE analysis of sera from transgenic mouse models reveals novel candidate protein biomarkers for human gastric cancer[ScienceDirect: S1874391912004964]
Clin Chim ActaAfamin — A pleiotropic glycoprotein involved in various disease states[PubMed: 25892677]
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