游离甲状腺素(fT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

ELISA Kit for Free Thyroxine (fT4)

FTI

    • 游离甲状腺素(fT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)产品包装(模拟)
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    • 游离甲状腺素(fT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)实验结果图
    • CEA185Ge.jpg标准曲线图
    • Certificate通过ISO 9001、ISO 13485质量体系认证

    特异性

    本试剂盒用于检测游离甲状腺素(fT4),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
    由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。

    回收率

    分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的游离甲状腺素(fT4)(加标样品),重复测定并计算其均值,回收率为测定值与理论值的比率。

    样本回收率范围(%)平均回收率(%)
    serum(n=5)79-9388
    EDTA plasma(n=5)80-8982
    heparin plasma(n=5)78-10395

    精密度

    精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100
    批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
    批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
    批内差: CV<10%
    批间差: CV<12%

    线性

    在定值血清及血浆样本内加入适量的游离甲状腺素(fT4),并倍比稀释成1:2,1:4,1:8,1:16的待测样本,线性范围即为稀释后样本中游离甲状腺素(fT4)含量的测定值与理论值的比率。

    样本1:21:41:81:16
    serum(n=5)81-97%78-93%79-104%86-101%
    EDTA plasma(n=5)90-99%90-104%91-101%94-105%
    heparin plasma(n=5)95-102%78-89%88-95%97-105%

    稳定性

    经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
    为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

    实验流程

    1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
    2. 加样(标准品及样本)50µL,
        加入50µL检测液A(临用前配制);
        37°C温育1小时。
    3. 洗板3次;
    4. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
    5. 洗板5次;
    6. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
    7. 加终止液50µL,立即450nm读数。

    实验原理

    本试剂盒应用竞争抑制酶联免疫分析法测定标本中待测物质水平。将T4单克隆抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗体的微孔中同时加入生物素标记的T4类似物和待测抗原(标准品或样本),待测抗原与生物素标记T4类似物对特异性抗体进行竞争结合。温育后经洗涤去掉未结合物,然后加入HRP标记的亲和素,经过温育和彻底洗涤后加入底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。待测标本浓度越高,标记抗原和抗体的结合就越受到抑制,显色愈浅。显色的深浅与酶量呈正相关,而与样品中待测物质含量呈负相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。

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    参考文献

    杂志参考文献
    Frontiers in cellular neuroscienceElevated Thyroid Peroxidase Antibody Increases Risk of Post-partum Depression by Decreasing Prefrontal Cortex BDNF and 5-HT Levels in Mice[pubmed:28119573]
    ARC Journal of Nutrition and GrowthEffect of Selenium and Zinc Supplementation on Hypothyroidism in Rats[ISSN 2455-2550]
    Frontiers in NeuroscienceModulation of Calcitonin, Parathyroid Hormone, and Thyroid Hormone Secretion by Electrical Stimulation of Sympathetic and Parasympathetic Nerves in Anesthetized Rats.[pubmed:28713236]
    Brain ResearchAge-Dependent Evaluation of Long-Term Depression Responses in Hyperthyroid Rats: Possible Roles of Oxidative Intracellular Redox Status[Pubmed: 31288003]
    Journal of Physiological SciencesThyroxin and calcitonin secretion into thyroid venous blood is regulated by pharyngeal mechanical stimulation in anesthetized rats[Pubmed: 31270742]
    International Journal of Clinical and Experimental MedicineApatinib inhibits proliferation of different lung cancer cells in vitro and in vivo by promoting apoptosis and inducing cell cycle arrest[]
    Int J Dev NeurosciEffect of L©\thyroxine administration on long©\term potentiation and accompanying mitogen©\activated protein kinases in rats[33576121]