内皮抑素(ES)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
ELISA Kit for Endostatin (ES)
- 编号SEA542Hu
- 物种Homo sapiens (Human，人)相同的名称，不同的物种。
- 实验方法双抗夹心
- 反应时长3h
- 检测范围0.625-40ng/mL
- 灵敏度最小可检测剂量小于等于0.255ng/mL.
- 样本类型Serum, plasma, tissue homogenates, cell lysates, cell culture supernates and other biological fluids
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- 规格48T96T96T*596T*1096T*100
- 价格¥ 2772¥ 3960¥ 17820¥ 33660¥ 277200
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特异性
本试剂盒用于检测内皮抑素(ES)，经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制，不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测，因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。
回收率
分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的内皮抑素(ES)（加标样品），重复测定并计算其均值，回收率为测定值与理论值的比率。
| 样本 | 回收率范围(%) | 平均回收率(%) |
| serum(n=5) | 87-101 | 94 |
| EDTA plasma(n=5) | 89-101 | 93 |
| heparin plasma(n=5) | 85-99 | 94 |
精密度
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批内差：取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差：选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差： CV<10%
批间差： CV<12%
线性
在定值血清及血浆样本内加入适量的内皮抑素(ES)，并倍比稀释成1:2，1:4，1:8，1:16的待测样本，线性范围即为稀释后样本中内皮抑素(ES)含量的测定值与理论值的比率。
| 样本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
| serum(n=5) | 78-103% | 95-102% | 91-101% | 98-105% |
| EDTA plasma(n=5) | 90-98% | 86-101% | 89-103% | 78-101% |
| heparin plasma(n=5) | 97-105% | 79-88% | 79-101% | 80-96% |
稳定性
经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
实验流程
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。
实验原理
将内皮抑素(ES)抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的内皮抑素(ES)与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的内皮抑素(ES)抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮抑素(ES)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值)，计算样品浓度。
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参考文献
| 杂志 | 参考文献 |
| Cancer Immunology | Endostatin gene therapy enhances the efficacy of IL-2 in suppressing metastatic renal cell carcinoma in mice[SpringerLink: u38777121t6660l5] |
| Journal of Fluoresence | Erythrocyte Protoporphyrin Fluorescence as a Biomarker for Monitoring Antiangiogenic Cancer Therapy[SpringerLink: 4v306130302257w0] |
| The Journal of Gene Medicine | Endostatin- and interleukin-2-expressing retroviral bicistronic vector for gene therapy of metastatic renal cell carcinoma[Wiley: source] |
| Biomedicine & Pharmacotherapy | Endostatin neoadjuvant gene therapy extends survival in an orthotopic metastatic mouse model of renal cell carcinoma[ScienceDirect: S075333221100151X] |
| Science Alert | Antiangiogenic Activities of Cinnamon, Black and Green Tea Extracts on Experimentally Induced Breast Cancer in Rats[Scialert: Source] |
| The Journal of Immunology | Inflammation Induced by MMP-9 Enhances Tumor Regression of Experimental Breast Cancer[PubMed: PMC3619527] |
| Prostaglandins & Other Lipid Mediators | Promotion of adipogenesis by an EP2 receptor agonist via stimulation of angiogenesis in pulmonary emphysema[Pubmed:24911647] |
| American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology | Endostatin and kidney fibrosis in aging: a case for antagonistic pleiotropy?[Source] |
| shock | Angiogenesis inhibitor endostatin protects mice with sepsis from multiple organ dysfunction syndrome[PubMed: 26125086] |
| Clin Rev Allergy Immunol | Endothelial Dysfunction and Nailfold Videocapillaroscopy Pattern as Predictors of Digital Ulcers in Systemic Sclerosis: a Cohort Study and Review of the Literature[PubMed: 26142066] |
| Angiologia e Cirurgia Vascular | Peripheral vasculopathy in Raynaud phenomenon: Vascular disease biomarkers[science:S1646706X16300052] |
| Clinical Rheumatology | Impaired angiogenesis as a feature of digital ulcers in systemic sclerosis[Pubmed:26920752] |
| Blood biomarker for early blood brain barrier disruption in ischemic stroke[patent:US20170199205A1] |
