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磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

ELISA Kit for Glypican 4 (GPC4)

K-Glypican; Glypican Proteoglycan 4; Secreted glypican-4

  • 磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)产品包装(模拟)
  • 磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)产品包装(模拟)
  • 磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)实验结果图
  • SEA998Hu.jpg标准曲线图
  • Certificate通过ISO 9001、ISO 13485质量体系认证

特异性

本试剂盒用于检测磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)，经检测与其它相似物质无明显交叉反应。
由于受到技术及样本来源的限制，不可能完成对所有相关或相似物质交叉反应检测，因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。

回收率

分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)（加标样品），重复测定并计算其均值，回收率为测定值与理论值的比率。

样本回收率范围(%)平均回收率(%)
serum(n=5)82-9586
EDTA plasma(n=5)80-10291
heparin plasma(n=5)80-8984

精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批内差：取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差：选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定，每个样本使用同一试剂盒重复测定8次，分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差： CV<10%
批间差： CV<12%

线性

在定值血清及血浆样本内加入适量的磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)，并倍比稀释成1:2，1:4，1:8，1:16的待测样本，线性范围即为稀释后样本中磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)含量的测定值与理论值的比率。

样本1:21:41:81:16
serum(n=5)98-105%89-101%90-99%80-101%
EDTA plasma(n=5)94-104%82-96%80-104%83-90%
heparin plasma(n=5)79-91%94-102%95-103%78-101%

稳定性

经测定，试剂盒在有效期内按推荐温度保存，其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响，实验室的环境条件需尽量保持一致，尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

实验流程

1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。

实验原理

将磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)抗体包被于96孔微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)与连接于固相载体上的抗体结合，然后加入生物素化的磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)抗体，将未结合的生物素化抗体洗净后，加入HRP标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值)，计算样品浓度。

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参考文献

杂志参考文献
PLoS One.Identification of adipokine clusters related to parameters of fat mass, insulin sensitivity and inflammation[Pubmed:Pmc4072672]
Aspects of fluid therapy in the critically ill. Experimental and clinical studies on fluid therapy in the inflammatory conditions.[250690_2_G5_Svajunas_S.pdf]
Intensive Care Medicine ExperimentalElevated plasma glypicans are associated with organ failure in patients with infection[Pubmed: 30618011]
Crit CareAlbumin infusion rate and plasma volume expansion: a randomized clinical trial in postoperative patients after major surgery[Pubmed: 31138247]
J Endocrinol InvestSerum glypican4 and glycosylphosphatidylinositol-specific phospholipase D levels are associated with adipose tissue insulin resistance in obese subjects with …[Pubmed: 32816247]
Heparin Binding Protein and Endothelial Glycocalyx Markers in Severe COVID-19–A Prospective Observational Cohort Study[]
Sci RepGlypican-4 in pregnancy and its relation to glucose metabolism, insulin resistance and gestational diabetes mellitus status[34903856]