头蛋白(NOG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)

ELISA Kit for Noggin (NOG)

SYM1; SYNS1; Synostoses(Multiple)Syndrome 1; Symphalangism 1(Proximal)

  • 头蛋白(NOG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)产品包装(模拟)
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  • 头蛋白(NOG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)实验结果图
  • SEC130Mi.jpg标准曲线图
  • Certificate通过ISO 9001、ISO 13485质量体系认证

特异性

本试剂盒对检测头蛋白(NOG)具有较高的灵敏度。
经检测人、小鼠、大鼠之间有100%的交叉反映。

回收率

分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的头蛋白(NOG)(加标样品),重复测定并计算其均值,回收率为测定值与理论值的比率。

样本回收率范围(%)平均回收率(%)
serum(n=5)78-10186
EDTA plasma(n=5)89-9792
heparin plasma(n=5)82-9589

精密度

精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%) = SD/mean×100
批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20 次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差: CV<10%
批间差: CV<12%

线性

在定值血清及血浆样本内加入适量的头蛋白(NOG),并倍比稀释成1:2,1:4,1:8,1:16的待测样本,线性范围即为稀释后样本中头蛋白(NOG)含量的测定值与理论值的比率。

样本1:21:41:81:16
serum(n=5)78-101%80-97%78-101%86-94%
EDTA plasma(n=5)93-102%78-89%78-103%98-105%
heparin plasma(n=5)78-97%78-96%90-97%80-88%

稳定性

经测定,试剂盒在有效期内按推荐温度保存,其活性降低率小于5%。
为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。

实验流程

1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。

实验原理

将头蛋白(NOG)抗体包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的头蛋白(NOG)与连接于固相载体上的抗体结合,然后加入生物素化的头蛋白(NOG)抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入HRP标记的亲和素,再次彻底洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的头蛋白(NOG)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。

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参考文献

杂志参考文献
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European cells & materialsThe BMP2 variant L51P restores the osteogenic differentiation of human mesenchymal stromal cells in the presence of intervertebral disc cells.[pubmed:28266688]
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Biotechnology and Applied BiochemistryThe BMP antagonist Noggin is produced by osteoblasts in response to the presence of prostate cancer cells.[pubmed:28981962]
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Journal of Cellular BiochemistryLow‐intensity pulsed ultrasound promotes bone morphogenic protein 9‐induced osteogenesis and suppresses inhibitory effects of inflammatory cytokines on cellular …[Pubmed: 31006911]
Aging MaleEffect of tadalafil on penile nitric oxide synthase and corporal smooth muscle in rats under dutasteride treatment[Pubmed: 32160825]
J Reconstr MicrosurgEffect of Simvastatin Use in Free Tissue Transfer: An Experimental Study in a Rat Epigastric Free Flap Model[Pubmed: 31995818]
Biochem Biophys RepSlow diffusion on the monolayer culture enhances auto/paracrine effects of Noggin in differentiation of human iPS cells induced by BMP[Pubmed:35005256]