武汉云克隆科技股份有限公司

近年来， 肥胖症呈爆发性的上涨趋势，由肥胖引发的代谢性疾病包括高血压 病、冠心病、高血脂病、糖尿病、脂肪肝以及胆石症等胆囊疾病的发病率也相应明 显增高，逐步成为全球性的主要健康问题之一。

据报道，脂肪组织作为分泌器官可分泌促炎性因子以及抗炎脂肪因子，这些因 子对于代谢健康有较好功效，而炎症脂肪因子的分泌失调可能是照成人体肥胖的主 要原因。

分泌型卷曲相关蛋白 5（SFRP5）是一种新型的抗炎脂肪因子。属于分泌型卷 曲相关蛋白（Secreted Frizzled Related Protein 5，SFRP5）家族成员。由于 SRRP5 可竞争性结合 Wnt5a 蛋白，抑制 Wnt 信号通路，同时抑制关键性的炎症细胞（主 要是脂肪组织中的巨噬细胞）的激活，减少炎症因子的分泌。SFRP5 作为肥胖和 其他代谢性疾病的链接点，深入研究 Sfrp5 和 wnt 信号通路中转导分子之间相互作 用，也许能够开启研发治疗与肥胖症有关的代谢性疾病的新机会。

基于这一研究热点，Cloud-Clone Corp.公司开发了一系列 SFRP5 重组蛋白，特 异性抗体以及定量检测试剂盒等相关产品。具体的产品研发过程如下。

首先，Cloud-Clone Corp. 利用高通量的表达系统表达重组 SFRP5 重组蛋白 测序正确后，采用传统的双酶切与 Cloud-Clone Corp.自主构建的大肠杆菌表达载体 pUSCNK-1 进行连接，并用于后期的蛋白表达。体外 IPTG 诱导表达，获得重组蛋 白 ( 融 合 his-tag) ， 采 用 镍 柱 纯 化 ， 获 得 纯 化 后 的 重 组 蛋 白 （ RPC842Hu01, RPC842Hu02，RPC842Mu01, RPC842Mu02，RPC842Ra01）,通过 SDS-PAGE 验证 蛋白纯度（>95%）和分子量。以人重组蛋白 SFRP5（RPC842Hu01）为例 SDS-PAGE 验证为例，结果如图 1

将得到的重组蛋白（纯度>95%），免疫小鼠，利用杂交瘤技术大批量制备单 克隆抗体，小鼠抗人 SFRP5（MAC842Hu22）及小鼠抗大鼠 SFRP5（MAC842Ra22）， 另外免疫家兔制备多克隆抗体兔抗人 SFRP5（PAC842Hu01 & PAC842Hu02）、兔 抗小鼠 SFRP5（PAC842Mu01 & PAC842Mu02）和兔抗大鼠 SFRP5（PAC842Ra01）， 抗体均采用亲和层析法纯化，特异性高获得纯化抗体后，通过 Western Blot 对其质 量进行了已系列检验，以小鼠抗人 SFRP5 (MAC842Hu22)为例，结果如图2所示。

将获得的不同种属的高纯度的 SFRP5重组蛋白以及高特异性的抗体作为原料， Cloud-Clone Corp.自主研制出相应的系列 SFRP5 ELISA 定量检测试剂盒（货号 SEC842Hu、HEC842Hu、SEC842Mu、SEC842Ra）。 方便广大科研工作者准确定 量生物样本中的蛋白含量，提供研究依据。科研学者们可以根据科研需要，对产品 进行选购。

SFRP5的相关定量产品获得国内外专家的认可，以下是使用产品发表的文献。