重症肌无力研究新发现
重症肌无力(MG)是一种导致神经肌肉接头(NMJ)损伤的自身免疫性疾病，其特征是不同骨骼肌区域的运动时虚弱和易疲劳。MG自身免疫攻击的自身抗体主要是靶向关键功能和结构NMJ蛋白，包括乙酰胆碱受体(AChR)、肌肉特异性激酶受体(MuSK)或低密度脂蛋白受体相关蛋白4(LRP4)。MG各种治疗方法的引入改善了生存率和预后。然而，很大一部分患者是难治性或不耐受性的，MG治疗的需求仍未满足。近期，多篇文献报道了MG相关研究，可能有助于MG新的治疗方法的开发。
1. 胸腺瘤胸腺髓质上皮细胞表达MG特异性异常神经肌肉基因
MG通常伴有胸腺瘤，胸腺瘤相关MG因其频繁出现危机、需要手术、围手术期管理困难、需要强化免疫治疗等原因，比其他形式的MG更难管理。然而，胸腺瘤患者并发MG的病因尚不清楚。通过使用大量和单细胞RNA测序构建胸腺瘤的综合图谱，日本大阪大学医学研究生院神经内科Tatsusada Okuno团队确定了MG型胸腺瘤中神经肌肉分子的异位表达[1]。这些分子存在于髓质胸腺上皮细胞(mTEC)的不同亚群中，他们将其命名为神经肌肉mTEC(nmTEC)。MG胸腺瘤还表现出专门产生自身抗体的微环境，包括异位生发中心形成、T滤泡辅助细胞积聚和2型常规树突状细胞迁移(图1)。细胞-细胞相互作用分析还预测了nmTEC和T/B细胞之间通过CXCL12-CXCR4的相互作用。免疫组织化学和MG胸腺瘤转录组的细胞组成估计进一步证实了MG胸腺瘤内nmTEC呈递神经肌肉分子的富集。总之，这项研究表明，nmTEC通过神经肌肉分子的异位表达在MG的发病机制中具有重要作用。
图1.胸腺瘤的MG病理
2. 嵌合自身抗体受体T细胞精确靶向MuSK MG中的自身抗原特异性B细胞
MuSK-MG是一种自身免疫性疾病，由于抗MuSK自身抗体破坏神经肌肉接头信号，会导致危及生命的肌肉无力。为了避免当前疗法的慢性免疫抑制，美国宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院皮肤学系Aimee S. Payne团队改造T细胞表达具有CD137-CD3ζ信号结构域的MuSK嵌合自身抗体受体(MuSK-CAART)，用于精确靶向表达抗MuSK自身抗体的B细胞[2]。MuSK-CAART表现出与抗CD19嵌合抗原受体T细胞类似的作用，用于去除抗MuSK B细胞，并在可溶性抗MuSK抗体存在下保持细胞溶解活性(图2)。在实验性自身免疫性MG小鼠模型中，MuSK-CAART降低了抗MuSK IgG，而没有降低B细胞或总IgG水平，反映了MuSK特异性B细胞的耗竭。这些数据有助于研究MuSK-CAART治疗MuSK自身抗体阳性MG的新药应用和临床研究设计。
图2.通过BCR与MuSK-CAART靶向抗MuSK B细胞显示出与抗CD19 CAR介导的细胞溶解相当的疗效
3. MG受体聚类和致病补体激活依赖于多个亚单位特异性抗体之间的协同作用
自身抗体可能干扰神经传递的三种机制是：受体的直接拮抗、补体介导的突触后膜的破坏和受体的增强内化。瑞士巴塞尔大学生物医学系Nicholas S. R. Sanderson从MG患者中分离出AChR特异性B细胞，并产生了六种重组抗体[2]。所有AChR特异性抗体均高突变，包括同型IgG1、IgG3和IgG4，并识别AChR的不同亚单位。在体外神经肌肉突触模型中，单个抗体没有显示出对AChR的显著拮抗作用，或AChR依赖的补体激活，并且在体内没有诱导肌无力症状。然而，抗体组合在体外诱导了强烈的补体激活，在被动转移MG大鼠模型中引起严重虚弱，与肌肉中的NMJ破坏和补体激活有关(图3)。最强烈的补体激活是由针对AChR不同亚单位的抗体组合介导的，这种组合也诱导了体外活细胞表面AChR簇的形成。他们认为不同表位特异性的抗体之间的协同作用是这种疾病的基本特征，也可能是补体介导的自身免疫性疾病的一般特征。针对不同受体亚基的抗体之间的协同相互作用的重要性可以解释血清抗AChR滴度和临床严重程度之间的差异，并对目前正在研究的治疗策略有影响。
图3.抗体组合对被动转移MG大鼠模型致病性的影响
参考文献
[1]Yasumizu Y, Ohkura N, Murata H, et al. Myasthenia gravis-specific aberrant neuromuscular gene expression by medullary thymic epithelial cells in thymoma [J]. Nat Commun. 2022;13(1):4230. (IF=17.694)
[2]Oh S, Mao X, Manfredo-Vieira S, et al. Precision targeting of autoantigen-specific B cells in muscle-specific tyrosine kinase myasthenia gravis with chimeric autoantibody receptor T cells [J]. Nat Biotechnol. 2023;10.1038/s41587-022-01637-z. (IF=68.164)
[3]Rose N, Holdermann S, Callegari I, et al. Receptor clustering and pathogenic complement activation in myasthenia gravis depend on synergy between antibodies with multiple subunit specificities [J]. Acta Neuropathol. 2022;144(5):1005-1025. (IF=15.887)
云克隆不仅可提供多种自身免疫疾病动物模型，包括重症肌无力、变态反应性脑脊髓炎、干燥综合征、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等，涵盖常见自身免疫疾病；还具有各类自身免疫疾病检测指标及上述AChR、MuSK、LRP4、CXCL12、CXCR4、CD19等相关产品，可助力广大科研工作者进行自身免疫疾病研究。
