活性蛋白 | 基质金属蛋白酶2(MMP2)活性蛋白
基质金属蛋白酶2（MMP2）是一种重要的酶蛋白，属于基质金属蛋白酶（MMP）家族，分子量为72 kDa，也被称为IV型胶原酶或明胶酶A。MMP2在细胞外基质的降解和重塑中发挥关键作用，能够分解IV型胶原蛋白、明胶等基质成分，从而促进细胞迁移和侵袭。在生理过程中，MMP2参与血管生成、组织修复和炎症反应；在病理状态下，其异常表达与多种肿瘤的侵袭和转移密切相关。例如，在结直肠癌、乳腺癌等癌症中，MMP2的高表达通常与肿瘤的侵袭性、淋巴结转移及不良预后相关。此外，MMP2还通过调节肿瘤微环境中的信号通路，影响免疫细胞的活性，成为癌症诊断和治疗的重要标志物和研究靶点。
○ 产品货号：APA100Hu61
明胶酶谱分析（gelatin zymography）主要用于检测明胶酶MMP2和MMP9，该方法灵敏度极高，10 pg的MMP2即可被检出。简要步骤如下：将不同浓度的MMP2（50ng、25ng、13ng、6.5ng、3.3ng、1.7ng）用SDS上样缓冲液 变性，并在非还原条件下电泳至含明胶（1 mg/ml）的SDS-聚丙烯酰胺凝胶（10%）中。经复性、孵育和考马斯亮蓝（CCB）染色后，活化的MMP2会水解周围明胶，在凝胶上呈现白色条带。本实验使用胰蛋白酶（trypsin）作为阳性对照，结果如图1所示。 重组人MMP2的酶活检测采用荧光肽底物MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-DPA-Ala-Arg-NH2在特定缓冲体系（50 mM Tris，10 mM CaCl2，150 mM NaCl，0.05% Brij-35，pH 7.5）中的切割能力进行评估。具体操作如下：将rhMMP2用缓冲液稀释至100 μg/mL后，加入终浓度1 mM的对氨基苯汞乙酸盐（APMA）于37℃孵育1小时进行活化。活化后的rhMMP2稀释至2.5 μg/mL备用。在黑色酶标板中每孔加入50 μL稀释酶液，通过追加50 μL 20 μM底物启动反应（对照孔为50 μL缓冲液+50 μL底物）。立即使用320 nm激发波长和405 nm发射波长进行动力学检测（5分钟）。该条件下，重组人MMP2的比活力＞170 pmol/min/μg。
