组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)活性蛋白

组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)是基质金属蛋白酶(MMP)家族的重要抑制因子,属于TIMP蛋白家族成员之一。TIMP2通过特异性结合MMP(尤其是MMP2和MMP9)的活性位点,抑制其蛋白水解活性,从而调控细胞外基质(ECM)的降解与重塑,在组织修复、炎症反应和肿瘤转移等生理病理过程中发挥关键作用。除抑制MMP外,TIMP2还可作为多功能蛋白参与细胞信号调控。例如,它通过激活整合素和生长因子受体(如IGF1R)影响细胞增殖、分化及凋亡。研究表明,TIMP2在多种癌症中表达异常,可能作为抑癌因子或促癌因子发挥作用,其双重角色取决于微环境上下文。此外,TIMP2还被发现与阿尔茨海默病等神经退行性疾病相关,可能通过调节β-淀粉样蛋白沉积影响病程。因其在ECM稳态和疾病中的核心地位,TIMP2已成为潜在的诊断标志物和治疗靶点,尤其在抗肿瘤和抗纤维化领域备受关注。


○ 产品货号:APA128Ga01 

○ 活性验证
TIMP2是一种分子量为22 kDa的非N-糖基化蛋白,可由多种细胞类型分泌,通过形成非共价二元复合物抑制MMPs活性。除抑制功能外,TIMP2还具有促红细胞生成和细胞生长促进作用。本实验通过荧光肽底物MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-DPA-Ala-Arg-NH2(检测缓冲液:50 mM Tris、10 mM CaCl2、150 mM NaCl、0.05% Brij-35,pH 7.5)评估重组鸡源TIMP2(rgTIMP2,分子量23 kDa)对重组人源MMP2(rhMMP2)的抑制活性。具体步骤为:将100 μg/mL rhMMP2经1 mM APMA于37℃活化1小时后,与系列浓度rgTIMP2(8 μL)及检测缓冲液(59.2 μL)混合(对照组仅含缓冲液与rhMMP2),37℃孵育2小时。取50 μL五倍稀释反应液加入微孔板,加入50 μL 20 μM底物启动反应(空白对照为50 μL缓冲液+50 μL底物),在320 nm激发波长/405 nm发射波长下进行5分钟动力学检测。如图1所示,rgTIMP2可显著抑制rhMMP2活性,其半数抑制浓度(IC50)小于16 nM。

○ 结果展示