组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)活性蛋白
组织金属蛋白酶抑制因子4（TIMP4）是基质金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）家族的重要成员，能够特异性抑制基质金属蛋白酶（MMPs）的活性，从而调控细胞外基质（ECM）的降解与重塑。TIMP4在心脏、脑、卵巢等组织中高表达，具有抑制肿瘤侵袭转移、调节炎症反应及维持组织稳态等功能。研究表明，TIMP4通过抑制MMPs（如MMP-2、MMP-9）的蛋白水解活性，影响肿瘤微环境，抑制癌细胞的侵袭和血管生成。在心血管疾病中，TIMP4可减轻心肌纤维化，改善心脏功能。此外，TIMP4在神经系统疾病（如阿尔茨海默病）中可能通过减少异常ECM降解发挥保护作用。然而，TIMP4的作用具有组织特异性，在某些癌症（如乳腺癌、前列腺癌）中可能呈现促肿瘤或抑肿瘤的双重作用，具体机制仍需进一步研究。TIMP4作为MMPs的关键调控因子，在疾病诊断和治疗中具有潜在应用价值。○ 产品货号：APA130Mu01
通过荧光肽底物MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-DPA-Ala-Arg-NH2的酶切实验，我们检测了重组小鼠TIMP4（分子量22.55kDa）对重组人MMP2（rhMMP2）活性的抑制效应。实验体系采用50mM Tris、10mM CaCl2、150mM NaCl、0.05%Brij-35（pH7.5）的缓冲系统。将100μg/mL的rhMMP2经1mM APMA于37℃活化1小时后，与系列稀释的rmTIMP4溶液（8μL）及缓冲液（59.2μL）混合反应2小时。取50μL五倍稀释的反应液与20μM底物等体积混合启动反应，以320nm/405nm的激发/发射波长进行5分钟动力学检测。如图1所示，重组小鼠TIMP4能显著抑制rhMMP2的蛋白水解活性，其半数抑制浓度IC50＜0.75nM，展现出强效的MMP2抑制能力。该结果证实TIMP4通过直接结合MMP2发挥其生理调控功能。○ 结果展示
