活性蛋白 | Toll样受体2(TLR2)活性蛋白

Toll样受体2(TLR2)是Toll样受体家族中识别谱最广的模式识别受体之一,作为先天性免疫应答的“前沿哨兵”,在宿主防御病原体入侵中发挥核心作用。它通常以跨膜蛋白形式表达于免疫细胞(如巨噬细胞、树突状细胞)表面,其胞外区富含亮氨酸重复序列,可特异性识别病原体相关的保守分子模式。TLR2需与TLR1或TLR6形成异源二聚体以精确区分不同配体:TLR2/TLR1主要识别三酰脂蛋白,而TLR2/TLR6则靶向二酰脂蛋白。其配体涵盖革兰氏阳性菌的细胞壁成分(如脂蛋白、肽聚糖、脂磷酸酸)、真菌酵母聚糖及某些病毒包膜蛋白。当配体结合后,TLR2通过胞内TIR结构域招募衔接蛋白MyD88,激活NF-κB和MAPK信号通路,驱动促炎细胞因子(TNF-α、IL-6等)、趋化因子及抗菌肽的大量产生,从而启动炎症反应并桥接适应性免疫。其活性异常与慢性炎症性疾病(如类风湿关节炎)、动脉粥样硬化及自身免疫病密切相关,同时也是感染性疾病治疗和疫苗佐剂开发的重要靶点。


○ 产品货号:APA663Hu02 

○ 活性验证

TLR2需与TLR1或TLR6及其他可能的辅助受体形成异源二聚体复合物发挥作用。这些复合物可识别革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、支原体和酵母菌的脂蛋白与糖脂——TLR2/TLR1异源二聚体结合三酰化脂肽,而TLR2/TLR6异源二聚体则优先识别二酰化脂肽。通过功能性酶联免疫吸附试验(ELISA)检测重组人TLR2与重组人TLR1的相互作用:将TLR2用含0.01%牛血清白蛋白的PBS缓冲液(pH7.4)进行梯度稀释,取100μl重复样本加入TLR1包被的微孔板中,37℃孵育1小时。经PBST洗涤后,加入抗TLR2多克隆抗体孵育1小时,弃液后洗涤3次。再加入HRP标记的二抗孵育,经5次洗涤后加入底物溶液,37℃显色15-25分钟。最终加入50μL终止液,立即于450nm波长下读数。如图1所示,TLR2与TLR1的结合活性呈剂量依赖性,半数有效浓度(EC50)为0.21μg/ml。

○ 结果展示

Figure 1. The binding activity of TLR2 with TLR1