骨再生研究好搭子——BMP2活性蛋白

2026-01-26

骨形态发生蛋白2（BMP2）作为TGF-β超家族中的重要成员，在骨骼发育与软骨形成过程中发挥着核心调控作用。该蛋白通过参与Hedgehog信号通路、TGF-β信号通路及细胞因子-细胞因子受体相互作用，广泛调控多种生理过程，包括心肌细胞分化和上皮-间质转化。其最显著的功能是能够高效诱导未分化的间充质干细胞向成骨细胞定向分化，启动被称为“成骨作用”的新骨形成过程。在分子机制上，BMP2通过结合细胞表面特异性受体，激活细胞内信号传导级联反应，从而启动骨再生程序。基于这一独特的成骨能力，重组人BMP2已成为重要的骨修复生物制剂，在脊柱融合、复杂骨折治疗及大型骨缺损修复等临床应用中，通过植入局部引导机体自身细胞完成新骨生成。

○ 产品货号：APA013Hu02

○ 刺激活性验证

为探究骨形态发生蛋白2（BMP2）对细胞凋亡的影响，将HepG2细胞以4000个/孔的密度接种于96孔板的复孔中，静置贴壁过夜；随后更换培养基，加入以含5%血清的标准DMEM培养基稀释的不同浓度重组人骨形态发生蛋白2（rhBMP2）。培养72小时后，通过倒置显微镜观察细胞形态，并采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测细胞增殖能力。具体操作如下：向96孔板各孔加入10μL CCK-8试剂，将培养板置于37℃培养1~4小时后，利用酶标仪检测450nm波长处的吸光度值。重组人BMP2作用HepG2细胞72小时后，经倒置显微镜观察到的细胞凋亡情况见图1；经CCK-8试剂盒检测的细胞活力结果见图2。结果显示，BMP2可显著降低HepG2细胞的活力，且该重组人BMP2的半数有效剂量（ED50）为3.25μL/mL。

○ 结果展示

Figure 1. Inhibition of HepG2 cells proliferation after stimulated with recombinant human BMP2.

(A) HepG2 cells cultured in DMEM, stimulated with 5μg/mL BMP2 for 72h;

(B) Unstimulated HepG2 cells cultured in DMEM for 72h.

Figure 2. Inhibition of HepG2 cells proliferation after stimulated with recombinant human BMP2.

○ 结合活性验证

研究发现卵泡抑素样蛋白1（FSTL1）是BMP2的相互作用蛋白。为检测重组人BMP2与重组人FSTL1的结合活性，我们采用ELISA结合实验方法：首先将BMP2在含0.01% BSA（pH 7.4）的PBS缓冲液中进行梯度稀释，取100μL平行样品加入FSTL1包被的微孔板中，37℃孵育2小时。弃去孔内液体后用PBST洗涤，加入抗BMP2多克隆抗体37℃孵育1小时，再次弃液并洗涤3次。随后加入HRP标记的二抗孵育，弃液后洗涤3次。加入底物溶液37℃孵育15-25分钟，最后加入50μL终止液，立即在450nm波长下测定吸光度。如图3所示，BMP2与FSTL1的结合活性呈现剂量依赖性效应。

○ 结果展示

Figure 3. The binding activity of BMP2 with FSTL1.