IL-18活性蛋白|免疫调控的核心玩家,促炎领域的研究利器
白介素18(IL-18)原名干扰素γ诱导因子,是白介素家族中重要的促炎细胞因子,主要由单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞及上皮细胞等分泌,以无活性的前体形式存在,需经IL-18转化酶(caspase-1)切割后才具备生物学活性。作为关键的免疫调节分子,IL-18可强效诱导T细胞、自然杀伤(NK)细胞等分泌干扰素γ(IFN-γ),促进Th1型免疫应答,同时能增强NK细胞和细胞毒性T淋巴细胞的杀伤活性,参与先天免疫与适应性免疫的协同调控,在抵抗病毒、细菌等病原体感染中发挥重要作用。此外,IL-18还可调节其他细胞因子(如TNF-α、IL-2)的产生,参与炎症反应的放大与维持,但过度表达时会引发免疫紊乱,与类风湿关节炎、银屑病、炎症性肠病等自身免疫性疾病的发生发展相关,同时其在部分肿瘤微环境中可通过增强抗肿瘤免疫抑制肿瘤进展,而在另一些场景下可能促进炎症相关肿瘤的发生,具有双重病理意义,目前也被视为相关疾病诊断和治疗的潜在靶点。○ 产品货号:APA064Hu01
研究发现半胱天冬酶-1(CASP1)是IL-18的相互作用蛋白,为验证两者结合特性,我们采用酶联免疫吸附试验进行检测:将重组人IL-18用含0.01%牛血清白蛋白的PBS缓冲液(pH 7.4)进行梯度稀释,取100μL重复样本加入CASP1包被的微孔板,37℃孵育2小时。经PBST洗涤后,加入抗IL-18多克隆抗体孵育1小时,再经三次洗涤后与HRP标记二抗共同孵育。完成三次洗涤后加入底物溶液,37℃显色15-25分钟,最终加入50μL终止液并于450nm波长下立即测定吸光度。结果显示(图1),IL-18与CASP1的结合具有剂量依赖性特征。