○ 结合活性验证 研究表明TGF-β1可与TGF-β受体1、核心蛋白聚糖(Decorin)、潜伏转化生长因子β结合蛋白1(LTBP1)等分子相互作用。为此,我们通过ELISA结合实验检测了重组人TGF-β1与重组人LTBP1的结合能力。简要步骤如下:将TGF-β1用含0.01%BSA(pH 7.4)的PBS缓冲液进行梯度稀释,取100μL稀释样品加入LTBP1包被的微孔板中,每个浓度设双复孔,37℃孵育2小时。弃液后使用PBST洗涤,加入抗LTBP1多克隆抗体37℃孵育1小时,再次弃液并洗涤3次。加入HRP标记的二抗孵育后,经3次洗涤,加入底物溶液37℃显色15-25分钟。最终每孔加入50μL终止液,立即于450nm波长下检测吸光度。如图1所示,TGF-β1与LTBP1的结合活性呈现剂量依赖性效应。○ 结果展示Figure 1. The binding activity of TGF-β1 with LTBP1.