云克隆胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)活性蛋白

IGFBP1

胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)

胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP1)是胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)家族的成员,由位于人类7号染色体上的IGFBP1基因编码,主要在肝脏、子宫内膜和蜕膜中表达。作为一种分泌性蛋白,IGFBP1在血浆中循环,能够以高亲和力结合胰岛素样生长因子I和II(IGF-I和IGF-II),从而延长IGFs的半衰期并调节其与细胞表面受体的相互作用。除了经典的IGF依赖性调节功能外,IGFBP1还能通过其C末端的RGD序列与整合素结合,不依赖IGF直接促进细胞迁移,激活黏着斑激酶(PTK2)和MAPK信号通路。该蛋白在细胞代谢、迁移和增殖中发挥重要作用,其水平异常与多种病理状况相关——低水平可能与糖耐量受损、血管疾病和高血压有关,而高水平则与子痫前期、胎儿生长受限等妊娠相关疾病的发生发展密切相关。

○ 产品货号:APA052Ra61

○ 结合活性验证
为检测重组IGFBP1的活性,我们通过功能性ELISA实验检测了重组大鼠IGFBP1与重组人胰岛素样生长因子1(IGF1)的相互作用。简言之,用含0.01% BSA的PBS(pH 7.4)将IGFBP1进行系列稀释。随后将100μl的重复样品转移至IGF1包被的微孔中,37℃孵育1小时。用PBST洗涤孔板后,加入抗IGFBP1多克隆抗体孵育1小时,然后吸弃并洗涤3次。加入HRP标记的二抗于37℃孵育1小时后,吸弃并洗涤5次。加入底物溶液,于37℃孵育15-25分钟。最后,每孔加入50μl终止液,立即于450/630nm波长处读取吸光度。重组大鼠IGFBP1与重组人IGF1的结合活性如图1所示,其半最大效应浓度(EC50)为0.222μg/mL。