IL10活性蛋白可抑制LPS刺激的THP1细胞产生IL1β
查看详情白介素10（IL10），又被称为细胞因子合成抑制因子（CSIF），是一种抗炎因子。IL10是一种多细胞源、多功能的细胞因子 ，调节细胞的生长与分化，参与炎性反应和免疫反应，是公认的炎症与免疫抑制因子。据报道，IL10可以抑制细胞因子的分泌，抑制单核巨噬细胞的抗原提呈作用。实验原理：IL10主要抑制脂多糖（LPS）介导的由巨噬细胞和Th1细胞产生的促炎细胞因子TNFα、IL1β、IL12和IFNγ的分泌。为验证IL10活性蛋白的活性，本实验通过LPS刺激THP1细胞产生IL1β，通过对比IL10对IL1β分泌的抑制作用，以评价IL10活性蛋白的活力。实验过程：将......
血管紧张素转化酶2（ACE2）活性蛋白
查看详情云克隆推出了三大物种科研用血管紧张素转化酶2（ACE2）活性蛋白产品，以期为助力科研尽绵薄之力。云克隆ACE2相关活性蛋白产品CatalogSpeciesProductAPB886Hu01HumanActive Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)APB886Mu01MouseActive Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)APB886Ra01RatActive Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)APX273Ge02Pan-speciesActive Spike Protein (SP)以人血管紧张素转化酶2，ACE2（APB886Hu01）活性蛋白为例，活性验证方案如下：实验原理：SARS-CoV和SARS-CoV-2的spike蛋白（SP）可通过......
什么是中和抗体，该怎么检测？
查看详情最近，在新冠疫情中想必大家总是听到一个专有名词——中和抗体，它是什么呢？和普通抗体有什么区别呢？在病毒学中，中和抗体（Nautralizing Antibody, ）首先是抗体，它在抗体这个层面上和普通抗体的概念重合，是机体免疫细胞被抗原激活后，由B淋巴细胞分化的浆细胞分泌的，能与相应抗原特异性结合的免疫球蛋白。除此之外，中和抗体显然还应该有专门针对“中和”的更进一层的含义，这里的中和是指该抗体能和病毒结合，进而阻断病毒感染。这种阻断能力主要通过三种方式来实现：1.阻断病毒与细胞表面受体的结合；2.阻断病毒侵入细胞；3.阻......
活性蛋白——IFN-γ的细胞刺激实验
查看详情干扰素γ（IFN-gama）是一种多功能蛋白，IFN-γ由T淋巴细胞和NK细胞产生，它既是一种高效的抗病毒生物活性物质，又是一种具有广泛免疫调节作用的淋巴因子。IFN-γ还能活化中性粒细胞、NK细胞，刺激血管内皮细胞和白细胞合成的黏附分子，促进Th1细胞发育并抑制Th2细胞活化与增殖。实验方案：据报道，IFNγ是人单核THP1细胞的重要激活因子。因此，我们选用THP-1细胞作为待刺激细胞，用不同浓度的IFNγ与THP1细胞在RPMI-1640培养基中共培养5天，在显微镜下每天观察THP-1细胞的形态。实验结果：A.THP1细胞在RPMI-1640培养基中以5ng/ml IFN-γ......
肽酰甘氨酸α-酰胺化单加氧酶活性实验
查看详情肽酰甘氨酸α-酰胺化单加氧酶（Peptidyl-glycine alpha-amidating monooxygenase, PAM）是多种多肽产生生物活性所必需的酶。它含有两个具有催化活性的酶活性域：肽基甘氨酸α-羟基化单加氧酶（PHM）和肽基-α-羟基甘氨酸α-酰胺化裂解酶（PAL）。这些催化结构域依次作用于将神经内分泌肽催化为活性的α-酰胺化产物。通常，将Dns-Tyr-Val-Gly底物水解为Dns-Tyr-Val-NH2作为PAM的典型活性测定法。实验方法：1.在1mL含100mM MES / KOH（pH 6.0）、30mM KI，30mM KCl，1μmol/ L硫酸铜，100ug / mL过氧化氢酶，1％（v / v）乙醇，0.001％（v /......
PNGase F活性测定
查看详情实验原理肽-N-糖苷酶F（PNGase F），可以在N-连接糖蛋白的高甘露糖、杂合和复合寡糖部分最内侧的N-乙酰葡萄糖胺和天冬酰胺残基之间进行切割。本试验以真核表达的重组Interferon Gamma（IFNg）蛋白为底物来测定重组肽-N-糖苷酶F的活性。实验试剂及仪器试剂：10×变性缓冲液：5% SDS，400mM DTT反应缓冲液：50mmol/L Tris(pH7.4)，150mM NaCl，1% NP-40仪器：SDS-PAGE电泳仪实验步骤将真核蛋白Interferon Gamma（IFNg）用1×变性缓冲液稀释成1μg/μL，在100℃煮沸10min使其变性。将重组蛋白PNGase F用反应缓冲液从1000ng/mL开始进行两倍稀......
蛋白活性实验-SOD3活性蛋白
查看详情实验原理Superoxide Dismutase 3, Extracellular (SOD3)，是SOD同工酶的一种。SOD3以Cu2+、Zn2+为辅基，属于CuZn SOD，可以消除体内代谢产生的反应氧族，抵御内外环境中超氧离子的损伤。由于超氧阴离子自由基O2 - 寿命短，不稳定，不易直接测定SOD活性，而采用间接的方法。本实验采用邻苯三酚自氧化法来间接测定，SOD的活性。邻苯三酚在碱性条件下能迅速自氧化，生成有色中间产物，在325nm下吸光值增加，加入SOD酶后能抑制其自氧化的速率，从而间接测定SOD酶的活性。实验试剂及仪器试剂：50mmol/L Tris-HCl，pH8.250mmol/L 邻苯三酚......
Caspase-3活性检测
查看详情实验原理Caspase-3是一种蛋白酶，属于半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)家族，在细胞凋亡中起着不可替代的作用。caspase-3可以被多种因素活化，在CTL细胞的杀伤作用中，它既可被Fas/FasL途径活化，也可以通过颗粒酶B途径活化。颗粒酶B是CTL细胞颗粒中的一种丝氨酸酯酶，是哺乳动物中除caspase蛋白酶外唯一的在Asp后剪切的蛋白酶，它可以特异性剪切ICE家族蛋白酶催化亚单位C端的XXD序列，并活化caspase 2、3、6、7、8、9、10。Caspase-3能催化特异性底物acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide (Ac-DEVD-pNA)水解生成对硝基苯胺,通过......