gABA的偶联改造
gABA（Gamma-Aminobutyric Acid）是哺乳动物中枢神经系统主要的抑制性 神经递质，主要作用是通过神经系统减少神经元兴奋性。gABA 在人体中可直接 调节肌肉紧张度及其他功能，当缺乏 gABA 时，人体会感觉焦虑和疲累，所以 gABA 的含量对人体的正常的生理机能起到重要的作用。
gABA 是一种天然存在的非蛋白质氨基酸，在各个物种的分子量一样， Cloud-Clone Corp.针对这一特点，开发了一系列偶联载体的 gABA 分子以及针对 gABA 的特异性抗体和 gABA 的定量检测试剂盒。gABA 产品的研制及面市，为 广大科研人员提供了系统的 gABA 研究工具体系。
1. gABA 偶联改造
gABA 分子量小，需要偶联载体进行改造才能成为具有免疫原性的抗原。 Cloud-Clone Corp. 采用戊二醛法将 gABA 分别偶联了 BSA、OVA、HSA，得到 BSA Conjugated gABA（CPA900Ge11）、OVA Conjugated gABA （CPA900Ge21） 和 HSA Conjugated gABA（CPA900Ge41）。基本过程是取该分子和载体蛋白， 在 PBS 中溶解，加入戊二醛，室温反应1h，用 G-100柱分离，得到完全抗原。 原理如下：
图2 gABA 偶联反应原理
2. gABA 抗体的制备以及偶联
以偶联 OVA-gABA 为抗原，免疫兔获得抗血清后，通过纯化和筛选得到抗 gABA 特异性的多抗（PAA900Ge01）。
在该抗体上标记生物素（biotin），获得 biotin 标记的抗 gABA 多抗 （PAA900Ge71）；标记 FITC，获得 FITC 标记的抗 gABA 多抗（PAA900Ge81）。
生物素标记方法：
生物素分子有两个环状结构（如图3），噻吩环上戊酸侧链末端羧基是结合 抗体和其他生物大分子的位点。生物素经过化学修饰变成带有活性基团的衍生 物——活化生物素，在蛋白质交联剂的介导下，可与生物大分子偶联，包括蛋 白质，核酸，多糖，脂类等。
将 gABA 用碳酸盐缓冲液溶解，按摩尔比1:1的比例加入活化了的生物素酯， 混匀，37℃过夜，之后用低分子量透析袋，透除（用0.01M PBS）未结合的 r-GABA， 浓缩，收集，分装冻干。
FITC 标记方法：
碱性条件下，FITC的硫碳铵键与蛋白质上的赖氨酸的γ氨基反应，得到FITC 标记的荧光复合物。基本原理如下：
FITC-N=C=S +N-H2-蛋白质 FITC-NS-C-N-H2-蛋白质
Cloud-Clone Corp. 采用的是 Marsshall 法进行标记。
3. gABA 试剂盒的生产
在 gABA 偶联载体分子及其抗体研制成功的基础上，Cloud-Clone Corp.还研 发了 gABA 定量检测试剂盒（CEA900Ge）。由于 gABA 是一个小分子，且在不 同物种中以相同形式存在，所以抗体和试剂盒可应用于不同物种的 gABA 检测。
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