• HepG2-luc稳定细胞系助力实验研究

    荧光素酶(luciferase)在一定条件下可以催化荧光素(luciferin),产生自发光现象(如图1)。荧光素或荧光素酶不是特定的分子,而是对于所有能够产生荧光的底物和其对应的酶的统称。目前比较常见的有萤火虫荧光素酶、海肾荧光素酶,海萤荧光素酶等。萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶组成的双报告系统在基因的表达调控、信号通路的转导作用、高通量药物筛选、siRNA和miRNA筛选等多个研究领域发挥重要作用。 图1. 荧光素酶与荧光素的发光反应萤火虫荧光素酶是目前研究中使用最为广泛的荧光素酶。它由550个氨基酸组成,翻译......

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  • 云克隆教你出完美Western Blot条带

    在Western Blot(WB)的实验过程中,总会遇到各种各样的问题:没有条带,杂带多,转膜不成功,曝光时间把握不好……WB实验周期长,操作步骤繁琐。怎么在繁琐的操作中快速找到问题所在是很多科研人员头疼的问题。不要急,云克隆用多年积攒的WB实验经验,为你分析解决WB实验过程中出现的各种状况。一、SDS-PAGE出现异常条带1. 微笑现象可能原因:凝胶的中间部分凝固不均导致。解决办法:待其充分凝固后再做实验。2.拖尾现象可能原因:样品融解效果不佳;电泳缓冲液时间过长;分离胶浓度过大引起。解决办法:加样前离心;加适量样品促溶......

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  • 除疤大作战 — 减少疤痕形成的新思路

    疤痕很常见,在生活中磕磕碰碰就可能留下疤痕。然而疤痕一旦形成,则很难去除,目前医学界仍无法完全消除疤痕。近期,有篇关于减少疤痕形成的研究登陆国际顶级期刊《Nature Communications》,为除疤提供了新的思路。 内皮细胞向间充质转化(EndMT)是导致器官组织纤维化和疾病的主要原因,然而其机制尚未阐明。内皮细胞具有强大的适应和重组的再生能力,这是由于血管内祖细胞(EVP)控制着内皮细胞的层次结构。通过分析,研究团队发现两个转录因子SOX9和RBPJ特异性地影响小鼠EVP的数量和调节谱系特化。当从小鼠血管系统(Sox9fl......

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  • 抑郁症—致命的“心理感冒”

    根据世界卫生组织(World Health Organization, WHO)的统计,目前全球有超过3亿人饱受抑郁的困扰。抑郁是一种情绪低落和悲观厌世的状态,就如同心理患上感冒,其主要症状表现为情绪低落、抑郁悲观、反应迟钝、思考困难、记忆力下降、注意力不集中、食欲和睡眠时间显著增加或减少等。而当“心理感冒”加重时,患者会感到沮丧、绝望,甚至会萌生自杀的念头。每年有百万人因抑郁致死,且因抑郁症死亡的人数呈逐年增长的趋势,抑郁症目前已成为仅次于癌症的第二大杀手。图1. 21种抗抑郁药的疗效及耐受度坐标图(图片来源:《Nature Neuros......

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  • 与免疫细胞并肩作战的逆行者

    当机体受到外来入侵者攻击时,由免疫细胞组成的免疫系统能够有效的防御外来入侵者。大家可能不知道,除了免疫细胞们,机体内抵御病原体的逆行者们还有这几种结构细胞——成纤维细胞、上皮细胞和内皮细胞。这些结构细胞不仅仅是器官的支架,它们还能与免疫细胞进行交流,参与抗病毒防御。Krausgruber等人在《自然》杂志上报道了一项对小鼠体内多器官结构细胞基因表达的检测,揭示了这些细胞在机体防御外来入侵者的信号网络中的作用,且结构细胞对外来入侵者的防御反应具有器官特异性。图1通过分析发现,小鼠体内的成纤维细胞、内皮细胞......

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  • 瘦不下来?原来是它在使坏。

    工作生活加班加点,身上肥肉只增不减,没迈开腿?没管住嘴?还是天要胖我,不得不胖?罪魁祸首可能是今天的主角—皮质醇。皮质醇,也称为“氢化可的松”,是肾上腺素分泌的糖皮质激素,作为一种“应激激素”,当人体遇到危险和紧急情况时,肾上腺素会瞬间分泌大量皮质醇,促进糖原分解消耗,生成葡萄糖,迅速给机体补充能量。不仅如此,它还能调节血压、控制睡眠周期、提升注意力和记忆力。正常情况下,皮质醇代谢有着固定的生理节奏(图1),24小时一个周期,早晨6点到8点水平最高,上午8点到12点其水平会大幅度下降,之后持续地缓慢下......

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  • 病毒载体的那些事儿

    什么是病毒载体?病毒载体,是指利用基因工程技术对病毒进行改造,成为外源基因运送的载体,其通过感染细胞,将外源基因带入细胞,并进行长期的基因表达。工具病毒载体具有转染效率高且外源基因表达水平高等优点,广泛应用于基础研究、基因疗法或疫苗制备等领域。常见的病毒载体有哪些?下面分别介绍工具病毒载体家族的三元大将,逆转录病毒(Retrovirus,RV)、慢病毒(Lentivirus,LV)和腺病毒(Adenovirus,ADV)。首先出场的是逆转录病毒,它又被称为反转录病毒,是一类RNA病毒,其遗传信息并非存储在DNA上,而是RNA上。不同于其......

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  • Nature揭秘运动提升免疫力新机理

    “健康地活着真好!”相信这是疫情平息后大家最为深刻的感受之一。保持人体健康的状态,最为经济有效的方式就是“运动”。人们发现运动能够有效的提升人体免疫力,清除侵袭机体的致病细胞,提高身体的抗病能力。最近《Nature》发表的研究成果揭秘运动提升免疫力的新机理。研究团队通过小鼠实验,发现运动能够刺激成骨祖细胞和免疫祖细胞相互作用,维持免疫祖细胞正常功能,促进淋巴细胞的产生,最终帮助动物抵抗感染。人体骨髓里住着许多类型的干细胞和祖细胞,各类的干细胞和祖细胞在生理和功能上都是相互紧密联系的,即干细胞生态位。......

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