• 活性蛋白IL2的促细胞增殖作用

    白介素2(IL2)的产生主要由T细胞受抗原或丝裂原刺激后合成,IL2在调节T细胞和B细胞的增殖中发挥着至关重要的作用。人IL2和小鼠IL2氨基酸序列的同源性是56%,提示其可能存在交叉性。因此,为了检测人重组蛋白IL2的生物学活性,我们选用小鼠CTLL-2细胞来进行细胞的增殖实验。实验方案:将CTLL-2细胞以5000个细胞每孔的细胞密度接种到96孔板中,并添加不同浓度的人重组IL2蛋白。孵育48h后,用倒置显微镜观察细胞,用CCK-8细胞计数试剂盒(cell Counting Kit-8)检测细胞增殖情况。实验结果: ......

    查看详情
  • 浅谈大鼠心肌细胞原代细胞的制备

    心肌细胞培养作为一种体外研究模型,可以更便捷的从细胞和分子水平对其生长、发育、生理、代谢、病理等进行研究。在许多研究领域原代培养心肌细胞作为一种主要的研究模型,被广泛应用于心血管研究之中。武汉云克隆动物有限公司凭借多年的实践经验总结了一些大鼠心肌原代细胞的处理方法,给大家分享:1 大鼠的选择新生大鼠鼠龄的选择新生大鼠心肌细胞在出生后3 d内具有部分的增殖能力,成年大鼠心肌细胞则为终末分化细胞,不再具有分裂增殖能力。因此,大鼠出生时间越短,其心肌细胞分离后成活率越高,越容易贴壁生长。大量观测表明......

    查看详情
  • 基质金属蛋白酶13活性实验

    基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinase)是一组具有多种共同生化性质的可以降解细胞外基质的酶,它们参与正常生命过程中结缔组织的再造。基质金属蛋白酶的降解作用在中性pH条件进行,需要有内在的Zn2+离子和外在的Ca2+离子存在;且酶活能被螯合剂和金属蛋白酶的组织抑制因子(Tissue Inhinbitor of Metalloproteinase,TIMP)所抑制。 基质金属蛋白酶13(MMP13)是基质金属蛋白酶家族的成员,研究表明MMP13参与与骨关节炎相关的聚集蛋白聚糖降解,骨关节炎软骨移植物中II型胶原蛋白的裂解,以及肿瘤的进展和转移。另外,MMP1......

    查看详情
  • 巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)与巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSF-R)的结合活性检测

    巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF),也称为CSF-1,是一种分泌型细胞因子,它可以影响造血干细胞分化为巨噬细胞或其他相关细胞。 M-CSF是造血生长因子,参与单核细胞,巨噬细胞和骨髓祖细胞的增殖,分化和存活。它还通过吞噬和趋化活性影响巨噬细胞和单核细胞,并增加了肿瘤细胞的细胞毒性。M-CSF的作用不仅限于单核细胞/巨噬细胞,通过与膜受体相互作用(C-fms编码的CSF1R或M-CSF-R原癌基因),M-CSF还可以调节早期造血细胞的增殖,并影响多种免疫、新陈代谢、生育能力和怀孕相关的生理过程。此外,巨噬细胞集落刺激因子受体(M-CSF-R......

    查看详情
  • 骨桥素活性蛋白诱导促炎趋化因子MCP-1的高表达

    骨桥素(Osteopontin,OPN),是一种多功能磷酸化糖蛋白,在中性粒细胞的募集中发挥有重要的作用,并可诱导促炎趋化因子的表达,如:MCP-1,MIP-1β。据报道,在乳腺癌细胞系MCF-7中,OPN可通过NF-kappa B信号通路诱导MCP-1的高表达。实验目的:观察在MCF-7细胞系中,OPN蛋白是否能诱导MCP-1高表达来验证OPN蛋白的活性。实验步骤:1.将MCF-7细胞以细胞密度1x105/ml过夜培养;2.分别以100ng/ml,200ng/ml的OPN蛋白与MCF-7细胞共培养24h;3.ELISA检测细胞上清中MCP-1的含量。实验结果:实验结论:克隆OPN活性蛋白可诱导MCF-7细胞上清中......

    查看详情
  • IGF1活性蛋白的促细胞增殖作用

    胰岛素样生长因子1(IGF1),又称生长调节素C,是一种在分子结构上类似于胰岛素但其促生长活性更强于胰岛素的低分子肽。据报道,IGF1能诱导多种细胞的增殖、迁移和分化,其中包括人乳腺癌细胞系MCF7。本实验通过观察IGF1活性蛋白对MCF7细胞系的促增殖作用来评估IGF1蛋白的活性。实验方案:1.将MCF-7细胞接种到96孔板中,接种3复孔,调整每孔细胞数2000个,培养过夜待细胞贴壁;2.更换为无血清的DMEM培养基,并加入不同浓度的IGF1蛋白,培养72小时;3.在倒置显微镜下观察细胞增殖的情况,并用CCK-8试剂盒进行细胞增殖的检测(每孔加......

    查看详情
  • 活性蛋白—肿瘤坏死因子β(TNFb)活性蛋白

    TNF-β是肿瘤坏死因子家族成员之一,是一种对多种肿瘤细胞具有细胞毒作用的强淋巴因子。TNF-β与TNF-α在分子结构和受体的相似性,决定了这两个分子具有非常相似的生物学效应。根据报道,TNF-α可抑制A549细胞增殖和诱导凋亡,刺激后细胞上清液中IL-1β浓度升高。实验证明,TNF-β也具有类似生物活性。实验方法:将A549细胞与TNF-β(10ng/mL)混合培养8h、24h、48h、72h后,分别用倒置显微镜观察细胞,ELISA法检测细胞上清液中IL-1β的含量。结果1:TNF-β(10ng/mL)作用细胞72h后,细胞凋亡明显。结果2:加入TNF-β(10ng/mL),细胞孵育8h......

    查看详情
  • 活性蛋白—粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)活性蛋白

    GM-CSF是一种单体糖蛋白,作为一种细胞因子,可刺激干细胞产生粒细胞(中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞)和单核细胞。众所周知,人红系白血病细胞TF-1,白细胞介素3(IL-3)或粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)可促进TF-1细胞增殖。因此,GM-CSF的活性可通过TF-1细胞增殖实验来测定的。据报道,GM-CSF也能诱导人单核细胞白血病细胞株U937分化。实验方案-1TF-1细胞作为待刺激细胞,用不同浓度rhGM-CSF与TF-1细胞在96孔微孔板中培养,每天用倒置显微镜观察细胞,用CCK-8细胞计数试剂盒(cell Counting Kit-8)检测细胞增......

    查看详情