• 神经氨酸酶(NEU)活性蛋白

    神经氨酸酶(Neuraminidase,NEU)是一种能分解(切断)神经氨酸糖苷键的糖苷水解酶。人类基因组中发现至少4种哺乳动物唾液酸酯酶同源物(见NEU1、NEU2、NEU3、NEU4)。体内缺乏神经氨酸酶,导致低聚糖在体内细胞中贮积,会引发唾液酸贮积症。在细胞内,组织蛋白酶A(Cathepsin A,CTSA)残基在溶酶体内与β-半乳糖苷酶(Galactosidase Beta,GLb)和神经氨酸酶NEU组成高分子量复合物。CTSA与这些糖苷酶的相互作用对它们进入溶酶体的正确途径是必须的,并防止它们发生溶酶体内水解。实验原理:神经氨酸酶NEU可与CTSA结合。本实验通过......

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  • 儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)活性蛋白

    儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)活性蛋白儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)是几种降解儿茶酚胺(如多巴胺、肾上腺素和去甲肾上腺素)、儿茶胆固醇以及具有儿茶酚结构的各种药物和物质的酶之一。COMT有两种亚型:可溶性短型(S-COMT)和膜结合长型(MB-COMT)。COMT在内源性儿茶酚胺神经递质、儿茶酚雌激素和异生分子的分解代谢中起重要作用。其通过向儿茶酚胺引入一个甲基,而导致儿茶酚胺神经递质(多巴胺、肾上腺素和去甲肾上腺素)的失活。儿茶酚胺甲基化的供体是S-腺苷甲硫氨酸(SAM)。任何具有儿茶酚结构的化合物,如儿茶胆固醇和含有儿......

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  • IHC实验避雷手册

    免疫组织化学技术又称免疫细胞化学技术,是指用标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项免疫检测方法。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性和分子生物技术的敏感性等巧妙结合,借助显微镜的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等),是单一的静止的形态学描述,上升到结构、功能和代谢为一体的动态观察,为疾病的诊断、鉴别诊断和发病机制的研究提供了强有力的手段。 然而,要想得到一张......

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  • 抗缪勒管激素(AMH)活性蛋白

    抗缪勒管激素(Anti-Mullerian Hormone,AMH)又称缪勒管抑制物(Mullerianinhibiting substance,MIS),一种二聚体糖蛋白,属于组织特异性TGF-β超家族生长因子。AMH由产后女性卵巢颗粒细胞(ovarian granulosa cells)及男性睾丸支持细胞(male sertoli cells)表达分泌。在胚胎发育阶段,AMH可调节生殖管道的分化和发育,对性别分化至关重要;出生后, AMH可调节男性睾丸间质细胞的功能;在成年女性中,AMH抑制原始卵泡的募集和窦卵泡的发育,防止卵泡过早耗竭。与其他TGF-β家族成员相似,AMH通过丝氨酸/苏氨酸激酶Ⅰ型受体和Ⅱ型......

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  • 瘦素(LEP)活性蛋白

    瘦素(leptin,LEP)是一种由白色脂肪细胞产生的激素,可通过抑制饥饿来帮助调节能量平衡。其前体由167个氨基酸组成,在血液中被切除N端信号肽,形成Leptin(16kD)。Leptin最为重要的生物学效应是通过下丘脑含神经肽的神经元和神经肽受体介导的,可抑制食欲,减少能量摄取,增加能量消耗以及抑制脂肪合成。尽管调节脂肪储存被认为是Leptin的主要功能,但它也在生长、生殖等生理过程中发挥作用。除了脂肪细胞和下丘脑细胞,在全身各个组织细胞中都能发现瘦素受体。瘦素和机体系统的病理生理相关性正逐步被人们了解发掘。实验原理:H......

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  • 肌酸激酶B(CK-BB)活性蛋白

    实验原理:肌酸激酶BB(CK-BB)是一种肌酸激酶。CK-BB由两个完全相同的脑型CKB亚单位组成的同二聚体,是一种参与细胞能量稳态的细胞质酶,其某些部分与细胞膜、ATP酶和细胞内多种需要ATP的酶结合。此外,肌酸激酶M(CKM)已被鉴定为CKB的相互作用因子。本实验通过结合ELISA检测重组人CK-BB和重组人CKM的相互作用。实验试剂:APC030Hu01 Active Creatine Kinase B (CK-BB)实验方法:用含有0.01% BSA的PBS(pH 7.4)梯度稀释CK-BB。将100μL样品移入CKM蛋白预包被酶标板中,37℃孵育2小时。弃去孔内液体,用PBST洗涤。除去洗液,加入抗CK-BB......

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  • 过敏毒素C5a活性蛋白

    过敏毒素C5a是补体系统的组成部分,能够促进中性粒细胞和单核细胞向血管壁的迁移及粘附。C5a可诱导THP-1细胞趋化迁移。因此,采用24孔细胞迁移/趋化分析系统,检测C5a对人单核细胞株THP-1的趋化作用。实验步骤:将THP-1细胞接种到趋化小室的上室(100µL细胞悬浮液,10^6个细胞/mL重置于含有0.5%FBS的RPMI 1640中),将重组过敏毒素C5a(用无血清RPMI 1640分别稀释至50ng/mL和100ng/mL)加入趋化小室的下室。上室和下室使用聚碳酸酯过滤器(8µm孔径)分隔。由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞,从而......

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  • 铁调素(Hepc)活性蛋白

    铁调素(Hepcidin,Hepc)是铁代谢的调节因子。Hepcidin通过与位于肠道肠上皮细胞基底外侧表面和网状内皮细胞(巨噬细胞)质膜上的膜铁转运蛋白(ferroportin,FPN)结合来抑制铁离子的转运。Hepc最终分解溶酶体中的转运蛋白,抑制FPN而阻止铁离子的输出,铁离子被隔离在细胞中。实验目的FPN已被鉴定为Hepc的相互作用因子,因此采用结合ELISA法检测重组人Hepc与重组人FPN的相互作用。实验步骤:用含有0.01%BSA的PBS(pH 7.4)梯度稀释Hepc。将100uL样本移入FPN蛋白预包被的酶标板中,37℃反应2小时。弃去孔内液体,用PBST洗板3次。加......

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