您的科研新选择,单链抗体scFv

随着基因工程抗体的研发,scFv(single-chain fragment variable)在理论和实际应用方面的研究引起了越来越广泛的关注。与经典抗体分子相比,scFv具有分子量小(约占完整抗体分子的1/6)的特征,也被认为是具有抗体生物活性的最小功能单位。scFv是由抗体重链可变区和轻链可变区通过15~20个氨基酸的短肽连接而成,不含Fc片段,属于小分子基因工程抗体。scFv最早是在酵母和植物细胞中成功表达并获得,能够自发折叠,形成天然结构,具有抗原结合特性。scFv在抗病毒、肿瘤治疗、自身免疫病治疗,靶向药物治疗等等方面有巨大的应用前景。

scFv具有抗原结合特性、穿透力强、体内半衰期短、免疫原性低、可在原核细胞系统表达以及易于进行基因工程操作等特点,对其开展的研究也是异常火热。目前多使用的是噬菌体表面展示技术制备scFv,制备过程如下:

1.抗体基因的克隆及重组。一般利用抗体可变区基因骨架区的特异性简并引物,通过PCR扩增出抗体重链和轻链可变区的基因,通过接头linker拼接成完整的scFv基因。

2.抗体基因表达载体的构建及表达。扩增成功的scFv基因转入噬菌粒载体,并转化宿主细胞,构建噬菌体单链抗体库。

3.噬菌体单链抗体库的富集、筛选。通常是用固相化的抗原与噬菌体抗体库孵育,通过数次吸附、洗涤、洗脱、扩增过程,可使特异的噬菌体得到109的富集,每一个噬菌体代表了一个抗体。

4.scFv单链抗体的可溶性表达。在单链抗体基因构建中,单链抗体基因C末端可引入c-Myc、组氨酸、GST、MBP、脂类标签等,使表达产物更易于检测和纯化。

Cloud-Clone Corp.经过多年的努力,已初步建立并拥有完整的单链抗体scFv制备平台(如图所示)。

Cloud-Clone Corp.打破传统单克隆和多克隆抗体制备工艺的限制,可为科研型客户和工业级客户提供最为优秀和全面的抗体制备服务。更多产品信息,请点击访问:www.cloud-clone.com