酶联免疫吸附测定实验（ELISA)常见样本处理方法
酶联免疫吸附测定实验（ELISA）是一种快速、灵敏、准确可靠的定量分析方法，样本的处理对于ELISA实验的成功有着举足轻重的作用。刚开始接触ELISA的时候，会遇到一些棘手的问题，容易导致实验出现这样那样的状况。
用于ELISA检测的常见样本类型包括血液（血清、血浆），组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清等。这些样本的收集时间、处理方法和保存方式都会影响ELISA实验的结果。下面我们将逐一介绍常见的样本处理方法，供研究者参考。
一、血液样本
血液采取后应尽快进行处理，使血清（浆）从与血细胞接触的全血中分离出来。
血清与血浆的区别：
血清是血液凝固后缺少纤维蛋原的血浆，故血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均等同于血清。
选择血清还是血浆样本？
由于血清中缺乏很多的凝血因子，但有一些凝血产物，如果是测凝血相关靶分子建议选择血浆样本；同时血浆中有纤维蛋白原，如果纤维蛋白原对待检测指标有影响，建议选择血清样本。大多数情况下二者均可以选择。
① 血清：将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1,000×g离心20分钟，取上清即可，将上清置于-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。
② 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1,000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。
二、组织匀浆
不同类型的组织制备匀浆的方法会有所不同
1） 取适量组织块，在预冷PBS（0.01mol/L， pH=7.0-7.2）中清洗去除血液，匀浆前先称重。
2） 将组织切成小块，均匀的放入放置在冰上的装有新鲜裂解缓冲液(货号IS007，应依据目标蛋白的亚细胞定位选择不同类型的缓冲液)的玻璃均质器中（微小的组织也要如此）。（质量体积比=1:20-1:50，例如：1mL裂解缓冲液中加入20-50mg组织样本。）
3） 将得到的悬浊液经过超声处理至澄清。
4） 将制备好的匀浆液10,000×g离心5分钟，弃沉淀，上清即可用于检测或置于-20℃下保存。
三、细胞裂解液
在分析试验之前，细胞需利用以下方法处理：
1）贴壁细胞应该用冷PBS轻轻清洗，然后用胰蛋白酶消化，于1,000×g 离心5分钟后收集。（悬浮细胞可通过离心直接收集）。
2）将收集到的细胞用冷PBS洗3次；
3）将细胞用新鲜裂解缓冲液重悬至密度为107个细胞/毫升，如果需要，细胞可以进行超声波处理至溶液澄清。
4）将标本于2-8℃ 1,500×g离心10分钟，弃沉淀，上清即可用于检测或置于-20℃下保存。
四、细胞培养上清
请1,000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，避免反复冻融。
五、粪便
称取约100mg(80-120mg)粪便，加入5ml PBS，用涡旋器振荡40秒。然后匀浆粪便溶液25-30分钟。取1ml匀浆物于新的EP管中，10,000rpm离心20分钟。吸取上清液至另一个新的EP管中，即可检测，或将上清置于-20℃ 或-80℃ 保存，但应避免反复冻融。
六、尿液
请收集清晨第一次尿液（中段尿），或24小时尿液，2,000×g离心15分钟后收集上清，并将标本保存于-20℃，且应避免反复冻融。
七、脑脊液
请离心后收集上清，并将标本保存于-20℃，且应避免反复冻融。
样本的处理是实验成功的第一步。处理样本的过程就是收集目标蛋白的过程，由于蛋白容易变性降解，处理过程应尽量温和。样本处理之后的保存也非常重要，尤其注意不要反复冻融，样本处理之后可分装密封保存， 4℃保存应小于1周，-20℃不应超过1个月，-80℃不应超过2个月。在标本使用前应缓慢均衡至室温，不应加热使之融解。