还在用蛋清亲和素?那你就out了,试试云克隆链霉亲和素。

链霉亲和素是一种来源于阿维丁链霉菌(streptomyces avidinii)的生物素结合蛋白,其非特异性结合远比亲和素低,蛋清亲和素含有大约7%的碳水化合物,且在中性pH值下带净正电荷,而链霉亲和素不含有碳水化合物,且在中性pH值下几乎不带净电荷,所以它被广泛用来作为抗生物素蛋白的替代品。在结构上,链霉亲和素以同源四聚体的形式存在,每摩尔分子可结合四摩尔的生物素分子,该特性使其广泛应用于多种生物化学及免疫学检测的信号放大体系。此外,本品还可用于多种酶和化合物的标记以及蛋白纯化。 目前云克隆云克隆链霉亲和素产品如下:IS120 链霉亲和素;IS089 辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素; 除了以上两种产品,云克隆还能提供各种荧光标记的链霉亲和素产品。 下面以辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素为例,看看其在免疫学检测中的应用。 1.应用于ELISA实验 板底预包被抗OVA抗体(货号:MAB459Ge21)浓度为2ug/ml,添加OVA初始浓度为50ng/ml,依次倍比稀释。稍后添加1ug/ml抗OVA抗体(货号:LAB459Ge71)。最后添加1ug/ml辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(货号:IS089)进行显色读数。 结果如下:

图1  ELISA实验   2. .应用于IHC实验

图2  增殖细胞核抗原(PCNA)的免疫组化实验 对人乳房组织进行微波抗原修复预处理,接着加入浓度为5ug/ml抗PCNA抗体(货号:CAA591Hu22)进行孵育。孵育后添加1ug/ml生物素标记山羊抗鼠二抗(货号:SAA544Mu17)紧随其后加入1ug/ml辣根过氧化物酶标记链霉亲和素 (货号:IS089)。采用DAB作为显色剂,组织切片用苏木精复染,用树脂封闭后镜检。 云克隆生产的链霉亲和素活性高且性能稳定,其活性大于16u/mg(1个酶活位可以结合1ug D-biotin)。其在相同的实验条件下,标记HRP后的SA与某知名厂家同类产品性能基本保持一致。稳定实验显示4℃放置一周测值基本无变化,加速破坏试验37℃放置一周测值下降<5%。作为诊断试剂原料供应商,云克隆可持续性的大批量供应高活力且性能稳定的链霉亲和素。