巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）与巨噬细胞集落刺激因子受体（M-CSF-R）的结合活性检测
巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF），也称为CSF-1，是一种分泌型细胞因子，它可以影响造血干细胞分化为巨噬细胞或其他相关细胞。 M-CSF是造血生长因子，参与单核细胞，巨噬细胞和骨髓祖细胞的增殖，分化和存活。它还通过吞噬和趋化活性影响巨噬细胞和单核细胞，并增加了肿瘤细胞的细胞毒性。M-CSF的作用不仅限于单核细胞/巨噬细胞，通过与膜受体相互作用（C-fms编码的CSF1R或M-CSF-R原癌基因），M-CSF还可以调节早期造血细胞的增殖，并影响多种免疫、新陈代谢、生育能力和怀孕相关的生理过程。此外，巨噬细胞集落刺激因子受体（M-CSF-R）被确定与M-CSF能交互反应，因此可通过结合酶联免疫吸附测定以检测重组人M-CSF和重组人MCSFR的结合力。
简而言之，将M-CSF在含有0.01％BSA（pH 7.4）的PBS中连续稀释，然后将不同浓度的M-CSF加入包被有M-CSF-R的微孔中，并在37℃孵育2小时。用PBST洗涤孔，并与抗M-CSF的抗体孵育1h，弃去液体并洗净3次。与HRP标记的二抗体孵育后，弃去液体并洗净3次。加入底物液50uL，将微孔板在37℃下孵育15-25分钟。最后，加入50µL中止液并立即在450nm读取。M-CSF和M-CSF-R的结合活性如下图所示：
以上使用的活动蛋白信息为：
巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）：APA090Hu01
巨噬细胞集落刺激因子受体（M-CSF-R）：RPB484Hu01