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2022年2月17日，清华大学药学院Bai Lu团队在《NATURE COMMUNICATIONS》上发表题为“TrkB agonist antibody ameliorates fertility deficits in aged and cyclophosphamide-induced premature ovarian failure model mice”的文章，确定了TrkB 激动剂抗体可用于卵巢早衰临床治疗。

在这篇文章中，云克隆试剂盒【雌二醇(E2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)，CEA461Ge；促卵泡素(FSH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)，CEA830Mu】受到科研工作者的认可，荣登优秀国际期刊。

研究简介

卵巢早衰(POF)是一种主要的人类不孕症。患有POF的妇女不仅会出现不孕不育，还会出现心理困扰、骨质疏松、自身免疫性疾病、缺血性心脏病等严重并发症。目前，对于POF尚无有效的治疗方法。脑源性神经营养因子 (BDNF) 是一种广泛研究的神经营养因子，现在也被称为卵巢内分泌因子。BDNF的受体TrkB在卵巢组织中表达。BDNF-TrkB信号传导是体内卵泡生长和卵母细胞存活所必需的。尽管 BDNF-TrkB 信号通路失调与 POF 之间存在关联，但研究表明，BDNF 本身不能用作药物，因为它的药代动力学差、扩散性有限以及激活另一种受体引起不同的作用等。因此，作者试图靶向 TrkB 开发用于治疗 POF的药物。

作者首先检查 TrkB 激动剂抗体 Ab4B19 是否可以进入卵巢卵泡并激活TrkB 信号传导。结果显示Ab4B19 可以以时间依赖性方式渗透到卵泡中。与 BDNF相似，Ab4B19有效地增加卵母细胞减数分裂，并且这种效应可以被 Trk受体抑制剂阻断。他们进一步确定 Ab4B19 是否可以在生理条件下促进卵母细胞排卵。在用 Ab4B19 处理发情前期成年小鼠后，与对照组相比，Ab4B19 处理组的黄体更多，表明 Ab4B19 促进了卵母细胞成熟。此外，Ab4B19 显著促进窦卵泡发育，但不促进原始卵泡和前窦卵泡。

为了确定 Ab4B19 是否可用于 POF 治疗，作者使用自然老化 POF 模型 (NA-POF)进行实验。Ab4B19 给药纠正了NA-POF小鼠中断的发情周期，改善卵巢的形态并增加了卵泡数量，减少闭锁卵泡，增加黄体的数量，并恢复窦前卵泡和窦卵泡的发育，而不影响原始卵泡。用 Ab4B19 治疗也逆转了血液 E2 激素的异常，阻止 NA-POF 小鼠卵巢退化。同时，施用 Ab4B19增加了排卵的卵母细胞数量，降低了NA-POF小鼠异常卵母细胞的比例。与未处理的 NA- POF 相比，用 Ab4B19 处理的 NA-POF 小鼠与正常雄性小鼠交配后，拥有更多的胚胎，显示出更高的妊娠能力。这些结果共同证明了 Ab4B19 在 NA-POF 模型中对生育力的有益影响。

环磷酰胺 (Cy) 是一种常用的化疗药物，可导致严重的卵巢损伤，并且是公认的 POF 风险因素。作者使用 Cy 诱导的小鼠模型 (Cy-POF) 来评估 Ab4B19 在 Cy 诱导后对保留原始卵泡的治疗效果。Ab4B19 治疗显著减轻 Cy 诱导的卵泡损伤，使其正常发育。Ab4B19 还逆转 Cy 诱导的闭锁卵泡增加，卵巢中窦前和早期窦期的凋亡指数得到改善。Cy 诱导的卵巢损伤伴随着 FSH 的增加，E2 激素的减少。Ab4B19 治疗将这两种激素的水平逆转至接近正常水平。此外，Cy-POF 小鼠表现出排卵卵母细胞数量减少和异常卵母细胞比例增加，并且用 Ab4B19 治疗也逆转了这些变化。进行交配试验后，他们发现与对照小鼠相比，Cy-POF 小鼠的窝产仔数减少，可被 Ab4B19 处理逆转。

最后，作者在人卵巢颗粒细胞癌 KGN 细胞系中验证Ab4B19 的效用。作者发现 Ab4B19 促进了 KGN 细胞的存活。将 Ab4B19 应用于培养的 KGN 细胞也刺激了CREB 磷酸化。为了进一步探索 POF 中 TrkB 激活的临床相关性，作者进行单细胞 RNA-seq 实验，以检测人卵巢滤泡中的 BDNF 和 TrkB mRNA 表达。发现与 BDNF 类似，用 Ab4B19 处理引起磷酸化 Erk 的显著增加，这是 TrkB 激活的敏感下游信号，提示Ab4B19 可离体激活人卵巢组织中的 TrkB 信号传导。

综上所述，Ab4B19 不仅可以延长和增强自然衰老小鼠的生殖能力，还可以保护 Cy 治疗小鼠的生育能力并修复发育中的卵泡损伤。 这些结果确定了TrkB 激动剂抗体 Ab4B19是一个潜在的治疗药物，可用于临床治疗POF，逆转不孕症。