胶原类的特点以及检测方法
查看详情胶原，主要存在于动物结缔组织中的结构蛋白，是哺乳动物中含量最丰富的蛋白质，占到了整个体内蛋白含量的25-35%。胶原可分为纤维型和非纤维型。最常见的是Type I，Type II，Type III，Type IV，Type V。其中Type I，II，III，V均是纤维型，而Type IV是非纤维型。人体绝大多数组织器官都含有胶原，目前为止共发现了28种胶原，而90%以上都是一型胶原。胶原可用于整容外科手术，骨移植，组织再生，伤口治愈等方面；然而胶原突变会引起各类疾病包括成骨不全症，软骨发育不全，埃勒斯-当洛斯综合征，遗传性进行性肾炎，骨质疏松症，Knobl......
单抗还是多抗？多肽还是重组蛋白？
查看详情我们收到这样一个定制抗体的订单询问，我要定制一个针对小鼠Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG)某一段序列的抗体，这段序列包含35-55位氨基酸，那么我是需要单克隆抗体好还是多克隆抗体好？制备抗体的时候是用多肽作为免疫原好还是用重组蛋白作为免疫原好呢？首先，我们来看看单克隆抗体和多克隆抗体的主要区别在哪里呢？单克隆抗体是针对单一抗原决定簇，来自单个B淋巴细胞克隆的抗体，多克隆抗体是针对多个抗原决定簇，由多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体。通常来说一个含有多个抗原决定簇的大分子免疫原进入机体后，其不同......
常见免疫检测的抗体标记种类
查看详情标记抗体是免疫电镜样品制备的一种常见方法，该技术由于操作简单、灵敏度高，常应用于IHC，WB，ICC，ELISA等实验。通过标记物的增强放大效应来定位分析抗原，是目前市面上理想的快速价廉的定量检测方法。抗体标记主要有酶标记、荧光素标记、同位素标记、生物素标记等，还有一些其他的标记方法例如胶体金标记，下面具体来展示云克隆公司研发的抗体标记种类：1、辣根过氧化物酶（HRP）标记，HRP标记单抗和多抗的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖基被氧化成醛基，随后与抗体蛋白的氨基结合，形成Schiff碱。常用的HRP的底物有邻苯......
APOB家族及其受体的检测
查看详情人体APOB由APOB基因进行编码，血浆中极低密度脂蛋白(VLDL )，中间密度脂蛋白(IDL)中均含有APOB。APOB的水平变化与脂质代谢，动脉粥样硬化等脑血管等疾病密切相关，是目前临床研究的热点。APOB在LDL中发挥作用的机理功能尚待研究。血浆中APOB以APOB48和APOB100这两种形式存在，其中APOB48主要在小肠中合成，而APOB100主要在肝脏中合成。APOB100是APOB群中最大的蛋白，通常提到的APOB实际上指的就是APOB100，它有4563个氨基酸。APOB48与APOB100有共同的N端结构，它是由编码APOB100的基因序列在第2153个氨基酸处产生了终止密码子而编码......
免疫组织化学原理图
查看详情免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。原理图如下：最常选用的免疫学检测方案之一。免疫组化实验中抗原修复方法的选择，抗体工作浓度的确定和染色方案等步骤都是决定实验成败与否的关键。许多实验人员面对繁琐的实验步骤，往往得到了不尽如人意的结果。在此，提前告诉大家一个好消息，Cloud-clone. Corp已开展免疫组化代测服务！！！具体情况，会在下一次的专题中公布，敬请期待！更多信息，请查阅htt......
重组蛋白的详细构建方法
查看详情应用重组DNA将目标基因进行表达得到的蛋白质成为重组蛋白，重组蛋白在生物信号传导过程，药物研发，科学研究中扮演着重要角色。下面来介绍一下重组蛋白的生产工艺流程。1.基因扩增（1）引物合成搜索目标蛋白基因信息，结合蛋白的结构信息，选取片段或全长设计引物。注意避开跨膜区，以及复杂的二级结构，优选N端或C端，引物评分尽可能高，并搜索出核酸序列的酶切位点，使用载体等信息。经研发部根据研发经验提出修改意见最终定稿后交由第三方公司进行引物合成。（2）基因克隆机重组鉴定1）PCR根据目的蛋白特异性表达组织，选取特异......
双抗夹心法CLIA检测原理
查看详情双抗夹心化学发光法（CLIA）是将双抗体夹心法与化学发光检测技术结合在一起的检测方法。它的一般实验步骤包括：将特异性针对待测抗原的抗体包被于 96 孔微孔板中，制成固相载体；向微孔中分别加入标准品或标本，使待测抗原与连接于固相载体上的抗体结合；此后加入生物素化的针对待测抗原的抗体，形成夹心；再将未结合的生物素化抗体洗净后，加入 HRP 标记的亲和素，再次彻底洗涤后加入鲁米诺发光底物，并用光子计数器，读出各孔的相对光度值（RLU）。此法与双抗夹心ELISA法的区别在于采用了增强型的ECL发光体系作为发光底物试剂来实......
免疫组织化学样本处理I
查看详情免疫组织化学用于观察标本的染色结果对靶抗原抗体进行鉴定和定位，其标本制备非常重要。在制作标本过程中，需保持抗原的完整性，在染色、洗涤包埋等过程中避免发生溶解和变性，同时防止扩散至邻近细胞或组织间隙中。图1. IHC结果示意图组织材料的处理是获得良好免疫组织化学结果的前提，活体组织，各种体液及穿刺液和细胞都可以用于免疫组化分析，针对不同的标本类型可以选择不同的制备方法。活体组织常选用石蜡切片和冰冻切片处理，而体液、穿刺液及细胞样本则选用涂片方式处理。对于细菌菌落或尸体病变组织，可将新鲜切面压印于玻......