活化的caspase 3的检测
查看详情Caspase (Cysteine aspartic acid specific protease，半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶) 是近年发现的一组存在于细胞质中，活化位点均含有半胱氨酸，且特异性断开天冬氨酸残基后肽键的蛋白酶。Caspase在细胞程序性死亡（又称凋亡，apoptosis）中起重要作用。迄今为止，已经发现的人的caspase家族成员已达12种。Caspase 3 是caspase家族的一个重要成员，其在细胞凋亡过程中作为最主要的终末剪切酶行使作用。该蛋白由pro-caspase 3 酶原经过进一步的加工而形成，pro-caspase 3 是一个含有277个氨基酸残基的前体蛋白，对其结构进行分析，可以分......
IN-FUSION一种高效无酶连接技术
查看详情在传统的分子克隆中，我们经常通过PCR技术扩增得到目的基因后，先构建T-A克隆载体，将基因在大肠杆菌中进行扩增，然后酶切阳性T-A载体和目标载体，最后进行目的基因和目的载体的连接。这个过程大概需要1-2周来完成，而且具有很大的局限性，主要表现在：1、载体多克隆位点和基因内部酶切位点的局限性；2、基因克隆过程中需要添加酶切位点，可能会带入非特异性扩增；3、对于长片段与目标载体的连接效果差；4、无法实现大规模载体的构建。IN-FUSION技术主要来源于INFUSION酶的发现，（如图）INFUSION酶能够识别线性化的DNA片段5’......
胶原类的特点以及检测方法
查看详情胶原，主要存在于动物结缔组织中的结构蛋白，是哺乳动物中含量最丰富的蛋白质，占到了整个体内蛋白含量的25-35%。胶原可分为纤维型和非纤维型。最常见的是Type I，Type II，Type III，Type IV，Type V。其中Type I，II，III，V均是纤维型，而Type IV是非纤维型。人体绝大多数组织器官都含有胶原，目前为止共发现了28种胶原，而90%以上都是一型胶原。胶原可用于整容外科手术，骨移植，组织再生，伤口治愈等方面；然而胶原突变会引起各类疾病包括成骨不全症，软骨发育不全，埃勒斯-当洛斯综合征，遗传性进行性肾炎，骨质疏松症，Knobl......
单抗还是多抗？多肽还是重组蛋白？
查看详情我们收到这样一个定制抗体的订单询问，我要定制一个针对小鼠Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein (MOG)某一段序列的抗体，这段序列包含35-55位氨基酸，那么我是需要单克隆抗体好还是多克隆抗体好？制备抗体的时候是用多肽作为免疫原好还是用重组蛋白作为免疫原好呢？首先，我们来看看单克隆抗体和多克隆抗体的主要区别在哪里呢？单克隆抗体是针对单一抗原决定簇，来自单个B淋巴细胞克隆的抗体，多克隆抗体是针对多个抗原决定簇，由多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体。通常来说一个含有多个抗原决定簇的大分子免疫原进入机体后，其不同......
常见免疫检测的抗体标记种类
查看详情标记抗体是免疫电镜样品制备的一种常见方法，该技术由于操作简单、灵敏度高，常应用于IHC，WB，ICC，ELISA等实验。通过标记物的增强放大效应来定位分析抗原，是目前市面上理想的快速价廉的定量检测方法。抗体标记主要有酶标记、荧光素标记、同位素标记、生物素标记等，还有一些其他的标记方法例如胶体金标记，下面具体来展示云克隆公司研发的抗体标记种类：1、辣根过氧化物酶（HRP）标记，HRP标记单抗和多抗的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖基被氧化成醛基，随后与抗体蛋白的氨基结合，形成Schiff碱。常用的HRP的底物有邻苯......
APOB家族及其受体的检测
查看详情人体APOB由APOB基因进行编码，血浆中极低密度脂蛋白(VLDL )，中间密度脂蛋白(IDL)中均含有APOB。APOB的水平变化与脂质代谢，动脉粥样硬化等脑血管等疾病密切相关，是目前临床研究的热点。APOB在LDL中发挥作用的机理功能尚待研究。血浆中APOB以APOB48和APOB100这两种形式存在，其中APOB48主要在小肠中合成，而APOB100主要在肝脏中合成。APOB100是APOB群中最大的蛋白，通常提到的APOB实际上指的就是APOB100，它有4563个氨基酸。APOB48与APOB100有共同的N端结构，它是由编码APOB100的基因序列在第2153个氨基酸处产生了终止密码子而编码......
免疫组织化学原理图
查看详情免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。原理图如下：最常选用的免疫学检测方案之一。免疫组化实验中抗原修复方法的选择，抗体工作浓度的确定和染色方案等步骤都是决定实验成败与否的关键。许多实验人员面对繁琐的实验步骤，往往得到了不尽如人意的结果。在此，提前告诉大家一个好消息，Cloud-clone. Corp已开展免疫组化代测服务！！！具体情况，会在下一次的专题中公布，敬请期待！更多信息，请查阅htt......
重组蛋白的详细构建方法
查看详情应用重组DNA将目标基因进行表达得到的蛋白质成为重组蛋白，重组蛋白在生物信号传导过程，药物研发，科学研究中扮演着重要角色。下面来介绍一下重组蛋白的生产工艺流程。1.基因扩增（1）引物合成搜索目标蛋白基因信息，结合蛋白的结构信息，选取片段或全长设计引物。注意避开跨膜区，以及复杂的二级结构，优选N端或C端，引物评分尽可能高，并搜索出核酸序列的酶切位点，使用载体等信息。经研发部根据研发经验提出修改意见最终定稿后交由第三方公司进行引物合成。（2）基因克隆机重组鉴定1）PCR根据目的蛋白特异性表达组织，选取特异......