• Cloud-Clone Corp. BCA蛋白定量试剂盒的分析

    目前世界上最常用于蛋白浓度检测的试剂盒为:BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)和Bradford法蛋白定量试剂盒(BradfordProtein Assay Kit)。BCA法具有简单、稳定、灵敏的特点。BCA法测定蛋白浓度兼容性也很好,因为它不受大部分样本中其他成分的影响。对于5%以内的SDS、Triton X-100、Tween 20、Tween 80具有很好的兼容性。在50~1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系,最小检出量为25μg/ml。当然,武汉云克隆公司也研发了自己的BCA蛋白浓度测定试剂盒。那么现就标准曲线,标准OD(450nm)值,样品OD(450nm)值,内控回......

    查看详情
  • 如何体外检测高迁移率族蛋白1

    高迁移率族蛋白1(High Mobility Group Protein 1),也被称为二性霉素,由HMGB1基因编码,由于在聚丙烯酰胺凝胶电泳中有很高的迁移率而被命名为高迁移率族蛋白1。下面我们主要以人HMGB1为参考,对高迁移率族蛋白1进行简要的介绍。蛋白:HMGB1跟组蛋白一样,HMGB1是最重要的染色质蛋白,在维持核小体稳定及DNA重组、复制、修复及基因转录扮演重要角色。此外,它在感染、炎症及免疫反应中也发挥重要的作用。HMGB1也是炎症损伤的研究热点之一。已有学者提出将HMGB1作为DNA疫苗的佐剂和癌症治疗的靶标。根据Uniprot上人HMGB1 链接,htt......

    查看详情
  • 活性蛋白1——集落刺激因子1

    通常来说,蛋白质基于其一级结构的氨基酸序列,可以用来作为免疫原使用;而其经过不同程度的折叠及空间排列后形成的空间构象则赋予了它特定的生物学功能,而在各种蛋白的不同生物学功能的共同作用下,就实现了生物的各种生理功能。所以对蛋白活性的研究是现在生物学和医学研究领域的热点,在研究中就需要使用到有活性的蛋白,而天然蛋白是很难获得的,所以现在所使用的活性蛋白也多是用基因工程的手段获得的。基因工程的手段获取蛋白需要经过多个步骤,也有多种表达方式。要获取活性蛋白,在基因序列、表达系统以及活性验证等过程中......

    查看详情
  • 内参蛋白抗体介绍II

    内参(Internal Control)是指试验系统的内部参照,一般对于哺乳动物细胞表达系统来说是指由看家基因(house keeping gene)编码表达的蛋白,他们在各种不同组织和细胞中的表达都相对恒定,在实验中检测蛋白表达水平时,常常选来作为参照物。上节我们介绍了三种常用胞浆的内参蛋白(肌动蛋白,β-Actin;β-球管蛋白,β-Tubulin;甘油醛-3-磷酸脱氢酶,GAPDH),这一节我们将会介绍其他几种内参蛋白。Na/k泵通道蛋白(Na+/K+-ATPase),即Na+/K+-ATP酶,是一种整合膜蛋白。其由1023个氨基酸组成,分子量为113KD。用WB......

    查看详情
  • 半胱天冬酶Caspase-1酶联免疫检测试剂盒应用于ATP 与LPS共激活的单核细胞中Caspase-1的定量测定

    Caspase家族作为细胞凋亡过程中的中心环节和执行者,与细胞凋亡等形态学特征密切相关,近年来受到了广泛的关注。Caspase-1是Caspase 家族第一个被发现的蛋白,早在1992年人类就克隆并测序其cDNA,随后Caspase家族相继共有14个成员被克隆出。Caspase-1作为凋亡机制中重要的效应成分,主要参与细胞因子介导的炎症反应并在死亡受体介导的细胞凋亡途径中起辅助作用,参与IL- 1β 的成熟和转运,同时还参与凋亡有关的生理和病理过程,在诸如生长因子、热休克、细胞因子和DNA损伤剂等刺激作用下,共同介导细胞内多种凋亡信号传导途径......

    查看详情
  • CD40和CD40L的体外检测

    CD40L(Cluster of differentiation 40 Ligand)和CD40 (Cluster of differentiation 40)是体内一对互补的的特异性免疫反应系统的共刺激分子, 在抗原呈递以及免疫反应中起重要作用,CD40L和CD40中的任何一个异常均会引起下游的一系列反应。CD40是TNFR超家族一员,是I型跨膜糖蛋白,主要在B细胞中表达。CD40作为APC(抗原呈递细胞)上的共刺激蛋白对APC的活化不可或缺。CD40 可与TRAF1,TRAF2,TRAF3,TRAF5,TRAF6以及TTRAP结合。CD40L最初发现于活化的T细胞表面,是TNF家族中一员, 是Ⅱ型跨膜蛋白。它可以和抗原提呈细胞(APC)进......

    查看详情
  • 只用1小时就能完成实验的ELISA试剂盒

    现在市面上常用的检测目的蛋白的ELISA试剂盒通常有两种,其中一种应用双抗体夹心法,另一种应用竞争抑制法,他们的实验时间通常都在3-5小时,需要准备多种试剂,分步加入并多次孵育,这样就对实验者的操作要求比较高,并且更易于引入人为误差以及污染。为了提高实验效率,减少实验误差,我们现研发出只需要1小时就能完成实验的快速检测ELISA试剂盒。该类试剂盒应用了较常规试剂盒更灵敏的抗体对,从而使其在极短的时间内也能针对性的识别目的分子,并使试剂盒的灵敏度与常规试剂盒相当,甚至更高。这里我们以S100B的检测试剂盒为例......

    查看详情
  • 新的基因系列产品--Taq酶

    在重组蛋白引物对Primer Pairs之后,Cloud-Clone Corp.再次推出了另一分子克隆的必须工具——Taq DNA聚合酶。Taq DNA聚合酶最初来源于1969年从美国黄石国家森林公园火山温泉中分离的水生栖热菌Thermus Aquaticus(Taq)yT1株。该酶基因含有2496个碱基,编码832个氨基酸,蛋白分子量大约为94kDa,它是一种具有热稳定性的DNA聚合酶(polymerase)。其最适工作温度在75-80℃,在PCR常规延伸阶段的温度条件下(72℃),每10秒钟可延伸约1000个核苷酸。Taq酶具有热稳定性,可以在90℃以上的高温中不失活,正因此才使PCR摆脱了需专......

    查看详情