• IGF1活性蛋白的促细胞增殖作用

    胰岛素样生长因子1(IGF1),又称生长调节素C,是一种在分子结构上类似于胰岛素但其促生长活性更强于胰岛素的低分子肽。据报道,IGF1能诱导多种细胞的增殖、迁移和分化,其中包括人乳腺癌细胞系MCF7。本实验通过观察IGF1活性蛋白对MCF7细胞系的促增殖作用来评估IGF1蛋白的活性。实验方案:1.将MCF-7细胞接种到96孔板中,接种3复孔,调整每孔细胞数2000个,培养过夜待细胞贴壁;2.更换为无血清的DMEM培养基,并加入不同浓度的IGF1蛋白,培养72小时;3.在倒置显微镜下观察细胞增殖的情况,并用CCK-8试剂盒进行细胞增殖的检测(每孔加......

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  • 活性蛋白—肿瘤坏死因子β(TNFb)活性蛋白

    TNF-β是肿瘤坏死因子家族成员之一,是一种对多种肿瘤细胞具有细胞毒作用的强淋巴因子。TNF-β与TNF-α在分子结构和受体的相似性,决定了这两个分子具有非常相似的生物学效应。根据报道,TNF-α可抑制A549细胞增殖和诱导凋亡,刺激后细胞上清液中IL-1β浓度升高。实验证明,TNF-β也具有类似生物活性。实验方法:将A549细胞与TNF-β(10ng/mL)混合培养8h、24h、48h、72h后,分别用倒置显微镜观察细胞,ELISA法检测细胞上清液中IL-1β的含量。结果1:TNF-β(10ng/mL)作用细胞72h后,细胞凋亡明显。结果2:加入TNF-β(10ng/mL),细胞孵育8h......

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  • 活性蛋白—粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)活性蛋白

    GM-CSF是一种单体糖蛋白,作为一种细胞因子,可刺激干细胞产生粒细胞(中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞)和单核细胞。众所周知,人红系白血病细胞TF-1,白细胞介素3(IL-3)或粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)可促进TF-1细胞增殖。因此,GM-CSF的活性可通过TF-1细胞增殖实验来测定的。据报道,GM-CSF也能诱导人单核细胞白血病细胞株U937分化。实验方案-1TF-1细胞作为待刺激细胞,用不同浓度rhGM-CSF与TF-1细胞在96孔微孔板中培养,每天用倒置显微镜观察细胞,用CCK-8细胞计数试剂盒(cell Counting Kit-8)检测细胞增......

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  • MIP1a活性蛋白对THP1细胞的趋化作用

    巨噬细胞炎性蛋白1α(Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha, MIP1a),又名趋化因子配体3(CCL3),属于趋化因子家族。MIP1a参与巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞的聚集及激活。实验目的:评估MIP1a活性蛋白对单核细胞系THP1的趋化作用。实验方案:1.将THP1细胞培养在0.5% FBS的RPMI 1640培养基中;2.用无血清的RPMI 1640培养基将MIP1a活性蛋白稀释至100ng/mL;3.将100ng/mL的MIP1a活性蛋白加入THP1细胞中;4.在37℃,5%CO2条件下培养5小时;5.在不同的显微镜视野下观察并计数细胞迁移的数量。实验结果:A.加入100ng/mL的MIP1a活......

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  • NGF活性蛋白诱导PC12细胞分化及其结合活性的验证

    NGF活性蛋白诱导PC12细胞分化实验实验原理:神经生产因子(Nerve growth factor, NGF)是一种神经营养因子和神经肽,主要参与某些神经元的生长发育、维持、再生长和分化作用。PC12细胞株来源于一种可移植的鼠嗜铬细胞瘤,该细胞对NGF有可逆的神经元显形反应,当PC12细胞暴露在NGF,细胞会在一周之内作出反应,主要是停止细胞分裂并延伸神经突。实验方案:PC12细胞培养在含5%胎牛血清和10%马血清的Ham's F12K培养基中,当细胞到达对数生长期时,换用含有10ng/ml NGF重组蛋白的新鲜培养基,在倒置显微镜下每天观察细胞的形态。实......

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  • IL4活性蛋白诱导THP1细胞的分化实验

    白细胞介素4(IL4)是II型辅助T细胞(Th2细胞)分泌的一种细胞因子。它有很多的生物学作用,包括:刺激活化B细胞和T细胞增殖;对于B细胞、T细胞、肥大细胞、巨噬细胞和造血细胞均有免疫调节作用。实验原理:体外培养状态下,外源性的IL4可诱导THP1细胞分化为树突状细胞和巨噬细胞。实验过程:将THP1细胞置于RPMI-1640培养基中,以2ng/mL IL4进行刺激。7天后,观察细胞的形态变化。实验结果:7天后,对比细胞的形态变化,如下:A.以IL4刺激后THP1细胞B.未刺激的THP1细胞实验结果:通过观察细胞的形态变化,可以发现用IL4刺激7天后的T......

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  • IL10活性蛋白可抑制LPS刺激的THP1细胞产生IL1β

    白介素10(IL10),又被称为细胞因子合成抑制因子(CSIF),是一种抗炎因子。IL10是一种多细胞源、多功能的细胞因子 ,调节细胞的生长与分化,参与炎性反应和免疫反应,是公认的炎症与免疫抑制因子。据报道,IL10可以抑制细胞因子的分泌,抑制单核巨噬细胞的抗原提呈作用。实验原理:IL10主要抑制脂多糖(LPS)介导的由巨噬细胞和Th1细胞产生的促炎细胞因子TNFα、IL1β、IL12和IFNγ的分泌。为验证IL10活性蛋白的活性,本实验通过LPS刺激THP1细胞产生IL1β,通过对比IL10对IL1β分泌的抑制作用,以评价IL10活性蛋白的活力。实验过程:将......

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  • 血管紧张素转化酶2(ACE2)活性蛋白

    云克隆推出了三大物种科研用血管紧张素转化酶2(ACE2)活性蛋白产品,以期为助力科研尽绵薄之力。云克隆ACE2相关活性蛋白产品CatalogSpeciesProductAPB886Hu01HumanActive Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)APB886Mu01MouseActive Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)APB886Ra01RatActive Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2)APX273Ge02Pan-speciesActive Spike Protein (SP)以人血管紧张素转化酶2,ACE2(APB886Hu01)活性蛋白为例,活性验证方案如下:实验原理:SARS-CoV和SARS-CoV-2的spike蛋白(SP)可通过......

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